免疫与抗体

Western blot

基本信息
服务名称:
Western blot
英文名称:
参考报价:
询价
总点击数:
1712
更新日期:
2012-10-30
服务类别:

服务详情

 

提供全套免疫印迹服务。
1. 蛋白质抽提
a.实验对象为组织样品,取适量(250~500mg)新鲜组织样品或正确保存的组织样品,加1ml含蛋白酶抑制剂的总蛋白抽提试剂(或核蛋白抽提试剂),匀浆后抽提总蛋白(或核蛋白)。
b.
实验对象为细胞样品,每份样品取1×1061×107细胞,PBS清洗细胞,去PBS0.1ml~1ml含蛋白酶抑制剂的总蛋白抽提试剂(或核蛋白抽提试剂)抽提总蛋白(或核蛋白)。 
2.蛋白质定量
 
用经典的Bradford法测定样品浓度。
3. 
免疫印迹实验
客户方需提供
1.
第一抗体(建议客户定购国外公司的一抗,以国外文献中报导的抗体为佳,如CSTABcam Zymed等著名抗体公司)
2.
预实验样本
3.正式实验样本
同时希望客户能提供相应的背景材料以利实验顺利完成,背景材料包括:样本描述,目的蛋白相关资料,必要的相关实验设计内容如阳性对照等等。
服务流程:

 
预实验:
如样本数目比较大、或样本量稀少比较珍贵时建议做预实验,以检测抗体质量和客户的样本情况。由于抗体的质量对于实验的成败至关重要,建议选用有质量保证的品牌抗体。
具体流程如下:
1.客户样本做蛋白含量测定,确定合适的上样量。
客户提供的样本若干23个做对照基因β-actin检测,如此步结果正常,进入目标基因测试。
2.根据客户提供的一抗和客户提供的样本做目标基因测试,确定抗体的合适用量摸定反应条件,一抗用量选用说明书推荐的上限偏高(最浓的)浓度如说明书推荐一抗稀释度在1200,到120000之间,则我们初次实验选用1100,如实验没有信号,再次确认后通知客户换抗体,如结果有目标信号则再根据结果摸定合适的反应条件,进行正式实验。
 
正式实验:
根据预实验摸定的反应条件,逐步分阶段进行正式实验,同时随时通知客户反应进程,调整实验。
 
服务方提供:蛋白显色图谱。
验收标准:蛋白显色图谱,条带清晰,对照基因基本一致。
 
公司简介

博仕生物医学服务中心(隶属于上海水源生物科技有限公司)是一家集科研、服务、培训、转化为一体的综合性生物服务平台,座落于中科院深圳先进技术研究院和嘉定工业区联合打造的-“BioCube育成生物科技园”。平台致力于将生命科学最新研究成果进行发掘、转化并应用到疾病诊疗、健康服务中去,促进疾病的改善和治愈,同时传播先进的科学技术和理念,提高公众对健康和生命科学的认知。平台拥有一只技术成熟、训练有素的研发团队,中心不仅与中科院、各大高校有密切的技术往来,而且和华东各大医院都有有深入的合作关系,进行广泛的项目研究,拥有将基础研究最新成果快速向临床转化的便利基础,同时依托嘉定工业区和深圳先进技术研究院的雄厚的资金、技术实力,将科研成果快速孵化、转化。平台提供技术研发外包、技术培训、技术转化、技术成果转让和交易等生物技术综合服务,欢迎来电洽谈业务!


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