Co-IP免疫共沉淀
免疫共沉淀可对两种已知蛋白是否存在相互作用进行验证，也可以验证在总蛋白中是否含有与已知蛋白相互作用的未知蛋白。其实验方法为将靶蛋白A与目的蛋白B进行孵育，形成“靶蛋白-目的蛋白”复合物。将靶蛋白的特异性抗体与复合物共孵育，形成“抗体-靶蛋白-目的蛋白”复合物，利用ProteinA/G纯化。通过结合western blot及质谱检测等对两种蛋白之间是否存在相互作用进行定性分析。
客户前期准备
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样本类型 |
样本要求（细胞、组织、蛋白样本） |
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细胞样本 |
细胞悬液或贴壁细胞：每份样本至少 2×107 细胞，在运输前将培养液充满整个容器，25T细胞瓶常温运输。 |
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冻存细胞：收获培养的细胞后，离心去除培养液，PBS洗2次，立即置液氮中快速冷冻。液氮冷冻半小时后，保存于-80°C冰箱，干冰运输。提供量至少 2×107 细胞。 |
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组织样本 |
组织样品预处理： 采集新鲜组织，组织块以PBS或生理盐水清洗干净，切为小块，放入液氮或-80°C冰箱中保存。提供量动物组织＞400mg/样本，植物组织＞2g/样本。 |
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运输：干冰运输。 |
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蛋白样本 |
1. 裂解样品总蛋白量>2ml/样品；细胞样品总蛋白浓度＞1mg/ml；组织样品总蛋白浓度10-15mg/ml。在实验前会进行质检，以保证其质量达到实验要求； 2. 在提取总蛋白时，加入蛋白酶抑制剂和磷酸蛋白酶抑制剂(尤其对于检测磷酸化蛋白)。 |
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运输：加在缓冲液中(蛋白裂解液)低温运输。 |
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客户提供一抗 |
运输：依据说明书，一般4°C或-20°C运输，严禁反复冻融。 |
免疫共沉淀（Co-IP）参考价格及项目周期
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服务项目 |
服务时间 |
价格 |
服务内容 |
交付结果 |
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免疫共沉淀 |
4-5周 |
5000/样品 |
Co-IP， Western blot鉴定Co-IP实验产物 |
实验报告，原始实验数据 |
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质谱检测 |
4-5周 |
询价 |
质谱鉴定和验证Co-IP实验产物 |
质谱鉴定结果 |
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Figure A. MDM2 induces SUMO-3 conjugation of p53. Stindt, M. H., Carter, S. A., Vigneron, A. M., Ryan, K. M., & Vousden, K. H. (2011). MDM2 promotes SUMO-2/3 modification of p53 to modulate transcriptional activity. Cell Cycle, 10(18), 3176–3188. |
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