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油菜花药培养的单倍体育种

基本信息
服务名称:
油菜花药培养的单倍体育种
英文名称:
Haploid breeding of rape anther culture
参考报价:
1-8000
总点击数:
1492
更新日期:
2017-02-04
服务类别:

服务详情

利用单倍体育种是克服杂种分离,提高获得纯和材料的效率,缩短育种年限的有效手段。花药离体培养获得单倍体育种在实践中得到应用,油菜花药离体培养已具备一定成熟的经验。

油菜花药培养的方法及程序:

油菜花药培养的方法有几种,但以液体添浮分步培养法效果较好。培养基为keller改良B

 1.花的采摘及小孢子发育时期检验  采收花蕾长1-1.5毫米的主花序3-10厘米作为材料,剪除不不合要求部分,用纱布包好,放入有标记(写明材料来源)的小烧杯中,加入少量清水。用醋酸洋红或PICCH染色液染色,观察小孢子发育时期,在小孢子发育为早核早期(即单核靠边期)培养及为理想,是小孢子启动的最佳期,容易进行分裂二形成细胞团,这是形成胚状体的先决条件。

 2.预处理 把选择好的材料进行低温预处理,放在8-10摄氏度的阴暗处5-8天,以提高胚状体诱导率,一直仿绣体形成,出发小孢子进行异化发育,从而形成二个貌似的核,产生第一次有丝分裂。预处理的作用在于小孢子保持较强的生活力,延迟衰老和防止花粉败育,增加可用活化花粉数。

 3.材料的灭菌 将花序在70%的酒精中迅速浸一下,取出放在0.1%升汞(或饱和漂白粉)溶液,浸泡10f分钟,取出后在超净工作台上剥取花药。

 4.接种 在超净工作台上进行无菌剥蕾、取药,注意保留好花药,伤损者剔除,种在改良B。液体培养基上进行悬浮培养,培养过程如下:

(1)高湿暗培养:培养时间在2-3天,这阶段是小孢子启动分列前期,瓷器的特点是粉壁变薄并开始分裂,分列式均等的,两个子核子在形态上十分相似,这是高湿处理十微管溶解,纺锤体解体的异变分裂的结果。

(2)常温暗培养:培养时间在7-10天,这阶段的作用在于为形成胚状体创造最佳条件,适合细胞分裂。此期的特点是前期在镜下可见到细胞团,后期出现小胚状体,这期间更换1-2次培养基。

(3)常温光培养:出现胚状后立即转移至光下进行培养,这阶段是黄色胚状体见光后变为绿色,继而发育成小植株。此阶段把形成胚状体的部分移至B。固体培养基或用1/2MS培养基。糖的浓度降至2%。这阶段应保证温度、光热及通气等条件,经常更换培养基,保证其顺利发育。发育的过程一般是先长出不定形叶,继而长出芽点,然后形成正常的单倍体植株。

 5.锻炼及成苗  把长出正常植株的三角瓶瓶口打开,在光下锻炼1-2周,取出幼苗,洗净培养基,移苗至培养体中,放在适宜的条件下进行成苗培养。

 6.染色体的检验 取幼苗进行鉴定,用对二氯苯饱和水溶液预处理4小时,然后固定24小时,通过95%-50%的递降乙醇液,用清水冲洗,放入1N盐酸中浸5-10分钟,换入新的1N盐酸液在60摄氏度的水浴中离解10分钟,过一下凉的1N盐酸,在锡夫氏试剂中染色过夜,用漂洗液漂净,然后水洗,最后在PICCH染色液或45%的醋酸中压片,在显微镜下鉴定染色体数目。

 7.染色体加倍  用0.05%的秋水仙素进行根系浸泡24小时,用水冲洗干净,定植在田圃。

公司简介

公司简介

武汉双螺旋生物科技有限公司(Wuhan Doublehelix Biology Science and Technology Co.,Ltd)位于武汉市武昌国家农业科技园内。公司荟集了诸多生物、农业、工程技术领域的资深专家、业界精英,集应用研究、开发、商业与市场运作一体。公司立足于生物与现代农业前沿领域,集合不同学科研究成果,不断推出质量优秀,引领行业趋势的新技术新产品。我们从事植物基因工程与产品开发、生物实验室设计与产品开发、智慧农业与物联网应用、生态农业等。

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我公司是国内首家全面从事植物遗传转化服务单位,已与数百家高校及科研所建立愉快合作关系,具有强大的植物转化平台:对棉花、玉米、水稻、番茄、油菜、烟草、拟南芥、生菜、高羊茅、马铃薯、百脉根、矮牵牛、短柄草、黑麦草、菊苣、苜蓿等诸多植物进行高通量转化。

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实验室工程设计及建设

公司拥有一支经验丰富的工程设计、施工安装的高素质技术团队。严格按照相关行业规范承接各类净化系统工程、实验室系统工程和环保工程的专业公司,是集设计、研发、销售、施工安装、维护一体化的专业较强的技术集成型企业。承接智能人工气候室工程、组培室工程、洁净工程、植物生长室、温室工程、智慧农业工程、生态农业等。如今,我们的工程设计与建设已大范围推广,并得到业内专家的高度肯定。

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