免疫与抗体

蛋白免疫印记杂交(WB)服务

基本信息
服务名称:
蛋白免疫印记杂交(WB)服务
英文名称:
Western Blotting
参考报价:
总点击数:
1505
更新日期:
2013-04-24
服务类别:

服务详情
实验目的:检测组织或细胞中特定目的蛋白的表达水平。
 
实验原理:将蛋白样本通过聚丙烯酰胺电泳按分子量大小分离,再转移到杂交膜上,然后通过一抗/二抗复合物对靶蛋白进行特异性检测的方法。其中的步骤包括蛋白样本提取制备,蛋白定量,电泳,转膜与显色。
 
 
实验内容与方法:
1、       蛋白提取:根据需要测定的目的蛋白主要来源(胞浆、胞核或者全蛋白),区分组织提取或者细胞提取,选取相应的试剂盒。
2、       蛋白定量:bradford法、BCA法或lowery法测定出所提取的蛋白含量。
3、       蛋白变性:5×电泳上样缓冲液,煮沸5~10分钟。
4、       凝胶电泳:垂直电泳分离出目的蛋白条带。
5、       转膜:将SDS丙烯酰胺中的蛋白通过水平电泳的方式转移到PVDF或者NC膜上。
6、       免疫反应:目的蛋白分别与相应的一抗、二抗结合。
7、       显色反应:通过化学发光法将蛋白条带显影至胶片上。
 
   (1)样本材料:
        新鲜或冷冻细胞不少于106个,新鲜或冷冻组织样本不少于50 mg。
        已提取的蛋白样品蛋白含量不低于0.1ug/ul。
   (2)试剂:蛋白提取与定量可根据客户要求选用特定试剂盒,如客户不提供
试剂盒且无特别要求,则选用凯基公司相应试剂盒产品。一抗二抗反应所用抗体客户自备,凯基也可以提供抗体代订服务。
 
实验周期:(2-8周,视样本数量而定)
 
服务报告:提交实验报告书(包括实验材料、试剂、仪器、实验过程方法、结果及分析)、原始数据、图片,文本或电子版。
 
收费标准:
全蛋白提取 (全蛋白提取及蛋白定量结果,80元/样)
核蛋白提取 (核蛋白提取及蛋白定量结果,100元/样)
膜蛋白提取 (膜蛋白提取及蛋白定量结果,200元/样)
预实验     (自行提供一抗,800元/膜)
正式实验   (自行提供一抗,1000元/膜,每张膜最多8个样)
公司简介
南京迪瑞生物技术有限公司成立于2011年初, 是一家专注于生命科学和生物技术领域的高科技民营企业,是国内代理销售生物试剂、耗材和生物技术外包服务的公司。销售的消耗品、分子生化试剂、免疫试剂和细胞培养试剂等,已被广泛应用于生命科学基础研究、开发应用、制药、生物技术等诸多领域。客户遍布大学、研究所、医院等科研机构。 

公司技术团队均具有海外留学背景,为广大科研工作者提供的生物信息学服务包括:基因芯片、DNA甲基化芯片 SNP分型芯片、MicroRNA芯片等芯片数据分析及其RNA-seq,chip-seq,miRNa-seq,GO KEGG功能分析,Pathway分析、调控网络分析,保守motif寻找,miRNA靶基因预测,TF靶基因预测,promoter预测转基因、基因敲除、条件性敲除、敲入服务、Real-time PCR服务、Western Blot服务、DNA甲基化服务(BSP法& MSP法)、二维电泳、酵母双杂交、高通量测序(小RNA测序、转录组测序等等)、普通DNA测序、菌种鉴定、质谱 

经销 Roche 、Merck、 Sigma 、Amresco、  BD、CST、invitrogen、OXOID、Fermentals(MBI)、Millipore、兰州民海、Bioflux、博日、天根等国内外知名品牌试剂,质量保证、价格合理,欢迎选购! 

耗材:主要提供Axygen、Corning 等细胞生物学、分子生物学耗材等(如:细胞培养板、吸头、离心管、冻存管等)、美国微柔手套等。 


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