分子与细胞

总RNA的提取

基本信息
服务名称:
总RNA的提取
英文名称:
总RNA的提取
参考报价:
总点击数:
3779
更新日期:
2009-09-15
服务类别:

服务详情
总RNA的提取

RNA是一种重要的遗传信息分子,完整RNA的提取和纯化,是进行Northern杂交、RT-PCR、定量PCR等RNA相关研究的重要前提。

基本步骤
1. 样品预处理
客户需提供新鲜的样品或取样后立即在低温(-20℃或-70℃)冷冻保存的样品,避免反复冻溶,反复冻溶会导致RNA的降解和提取量下降。
● 植物组织——液氮研磨
● 动物组织——匀浆、液氮研磨
● 培养细胞——蛋白酶K消化
● 细    菌——溶菌酶消化
● 酵    母——液氮研磨、玻璃珠破碎
2. 细胞裂解(异硫氰酸胍/苯酚法)
● 这是传统的提取RNA的方法,适用于大部分动植物材料。异硫氰酸胍能使核蛋白复合体解离,并将RNA释放到溶液中,采用酸性酚-氯仿混合液抽提,低PH值的酚将使RNA进入水相,而蛋白质和DNA仍留在有机相,从而完成RNA的提取工作。
3. RNA的纯化(有机溶解抽提法)
● 用氯仿抽提裂解液,去除蔗糖、蛋白等杂质,并促进水相与有机相的分离。高速离心后收集水相,用0.6倍体积的异丙醇或与水相等体积的异丙醇沉淀RNA。室温沉淀20-30分钟,低温高速离心,获得RNA沉淀。用无RNase的75%乙醇洗涤RNA沉淀,干燥后用适量RNase-free ddH2O 溶解RNA沉淀。
4. RNA的检测
● RNA完整性检测
用甲醛变性凝胶电泳检测RNA的完整性。
● RNA得率检测
用分光光度计测定RNA溶液在260nm处的吸光值。用标准品测得在波长在260nm,1ug/mlRNA钠盐吸光度为0.025(光程为1cm),即OD260=1时,样品中RNA浓度为40ug/ml。
● 总RNA浓度(ug/ml)=OD260×稀释倍数×40ug/ml
5. RNA纯度检测
● 通过OD260/OD280检测RNA纯度。
● OD260/OD280值在1.9-2.1之间,RNA的纯度较好
● OD260/OD280值小于1.8,表明蛋白杂事较多
● OD260/OD280值大于2.2,表明RNA已经降解

价格.实验周期

 服务项目  样品要求  收费标准  实验周期
 细胞总RNA提取  细胞用量:1x104—1x106个,新鲜培养(1-2天)  100元/样品  5个工作日 
 组织总RNA提取  组织用量:500mg,新鲜标本或液氮冻存的标本  120元/样品  5个工作日 
 血液总RNA提取  血液用量:5ml,新鲜或液氮冻存的标本  120元/样品  7个工作日 
 菌液总RNA提取  对数生长期的新鲜菌液1~2ml  80元/样品  5个工作日 

以上实验周期是针对正常实验样品制定的,样品特殊或样品多时除外。

提供结果
包括总RNA的琼脂糖凝胶电泳图、OD值测定结果、总RNA的浓度。

公司简介

尚柏生物医学技术(北京)有限公司创建于2000年,已经获得国家经营三类医疗器械许可(证号:京081876)和北京市科学技术委员会认定的高新技术企业(统一编号:0611008A21672)。公司总部位于高校云集的北京市海淀区中关村科技园区,座落于中国铁路建设总公司铁建医院。与军事医学科学院、301医院、305医院等国内外知名的科研单位和医院紧密为邻。2007年7月11日,SUNBIO正式被北京中医药大学授权为"国家基础医学与生命科学人才培养实训基地",SUNB IO不断积累和总结实习带教经验,使学生的理论知识和人生阅历通过SUNBIO这个平台得到实践和丰富。SUNBIO将不断加强实训基地的基础设施和人才队伍的建设,逐步完善实习教学模式,争取成为更多基础医学、生命科学教学示范单位的人才培养基地。

尚柏生物致力于尖端免疫学和分子生物学技术在科研中的应用与推广,专业从事免疫检测及其他相关产品的引进、服务和研发。目前已经拥有自主知识产权专利产品6项。尚柏生物公司是一家深受客户信任的高质量服务供应商,通过高度细分、全方位的服务平台,向生物制药和医疗仪器公司提供生物医学产品测试,合同研究及开发,以及生物 cGMP 生产服务。

SUNBIO生命科学实验中心作为尚柏生物的核心技术平台,由加拿大籍华人投资人民币800万元,拥有专业的实验室、洁净的动物房和一流的实验设备(实验室总面积达200平方米拥有仪器设备20余台,较大型仪器设备有:荧光定量PCR仪器、CO2培养箱、超低温冰箱、荧光显微镜、高速冷冻离心机、PCR仪、垂直电泳仪、自动生化分析仪、紫外分光光度计、酶标仪、超净工作台等)和经验丰富的技术人员,其中助理研究员(博士)4人,实验师(硕士)12人,已经发表的SCI文章6篇,国家核心期刊文章20余篇,完整的实验记录多达5000多份。科研项目涵盖临床医学、免疫学、细胞生物学、分子生物学等生命科学诸多领域,具体的实验方法有:普通PCR、荧光定量PCR(real-time PCR)、Western印迹、流式、ELISA、免疫组化、细胞培养、MTT、放免、实验动物饲养及造模等。同时本实验室人员有丰富的新药研发企业工作经验,能够承担新药药效学及毒理学实验,提供新药申报资料、文献查询及综述内容的整理服务。

SUNBIO生命科学翻译中心作为尚柏生物旗下全资子公司,专门从事医学、医药类口笔译的专业化翻译公司长期以来,SUNBIO翻译中心为卫生部、药品监督管理局下属多家单位及多家著名跨国医药企业提供口、笔译服务,获得一致好评。SUNBIO翻译中心以国内知名医科、药科院校,科研院、研究所翻译专家、教授,医学博士,药学博士及外籍(美、英、德、日、韩等)专家为主要依托,云集国内中西医专业翻译人才,以及国外留学回国人员,致力于国内外中西医基础理论、医疗、制药、生物技术、医疗器械、化妆品、食品卫生、兽医等医药相关行业的专业化翻译服务。SUNBIO翻译中心可提供英、日、韩、法、德、俄、意、西班牙等十余种语言的口译、笔译服务。SUNBIO翻译中心坚持奉行“专业、严谨、快捷”的宗旨,凭借装备精良的专业化翻译队伍,以SUNBIO严谨的作风,为客户提供快捷、足不出户的翻译产品和服务。SUNBIO翻译中心视质量为企业生存之根,效率为生存之本,按照GB/T19002-1994 idt IS9002:1994 标准的要求,建 立了先进的质量管理体系和内部管理制度,并全面运用全球最先进的塔多思(TRADOS)翻译记忆软件,以及Freehand、Pagemaker、CorelDraw等制图排版软件,竭诚为海内外广大客户提供最佳的专业化翻译产品和高品质的翻译服务。

公司充分依托装备精良的研究平台,结合自身的技术优势和精良的人力资源,始终不懈的跟踪生命科学领域发展的最前沿。目前,公司承担众多科研院校的国家863、973等科研项目的技术服务,通过我们的高效服务,全国众多客户在EJP, JBC等杂志上发表了影响因子较高的SCI论文。协助近百名研究生进行科研选题和课题合作服务,这些研究生在毕业答辩时都获得了答辩组专家好评,其中一位已获得全国优秀博士论文荣誉。

我们所做的一切都是为了使您的工作更轻松、更快捷。良知使我们不断拿出和引进更好的产品,控制和降低各种成本,为您的研究加油,加速我国自有成果的开发,最终摆脱对进口产品的依赖。这是一项长期艰苦的工作,这是一项光荣伟大的工作,这是我们继续发展的动力。


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