分子与细胞

RNAi技术服务

基本信息
服务名称:
RNAi技术服务
英文名称:
RNAi技术服务
参考报价:
总点击数:
1793
更新日期:
2009-09-15
服务类别:

服务详情
RNAi技术服务
    RNA干扰(RNA interference,RNAi)现象是指内源性或外源性双链RNA (dsRNA) 介导细胞内mRNA发生特异性降解,导致靶基因的表达沉默,产生相应的功能表型缺失。这一现象属于转录后的基因沉默机制 (Posttranscriptional gene silencing,PTGS)。

    研究表明,RNAi可能的作用途径大致可分为两种:一种是以线虫、真菌和植物为代表的RdRp(RNA-dependent RNA polymerase)途径。RNAi现象有一个靶RNA的大量产生过程,产生的靶RNA在Dicer的进一步作用下, 产生大量的siRNA,达到有效浓度的siRNA能够启动RNAi机制,降解靶mRNA;另一种途径以果蝇和哺乳动物细胞为代表,外源或内源的双链RNA在Dicer的切割下生成siRNA,这些siRNA与其他蛋白质形成RISC(RNA-induced silencing complex)结构,能够识别切割靶mRNA分子。RNAi现象除了使生物体拥有抗病毒、稳定转座子和参与胚胎发育的生物学功能外,还可作为未知功能基因的逆向遗传学的研究手段。目前,RNAi已成为哺乳动物基因功能研究的重要方法。



RNAi实验方法

◆ RNAi实验流程
    ● 设计siRNA
    ● 合成siRNA
    ● 将siRNA导入细胞
    ● 监测RNAi效果

◆ 反义寡核苷酸技术
    DNA上携带有编码蛋白质的氨基酸信息的核酸序列的链,称为正义链(senses trand);另一条链的核苷酸序列与正义链互补,称为反义链(antisensestrand)。所谓反义寡核苷酸(antisense oligo-deoxyribonucleotide,AS-ODN)又称“反义核酸”,即为人工合成长度为10-30个碱基的DNA分子及其类似物,通过Watson-Crick碱基配对,与靶基因mRNA(正义链)上的特定序列杂交,从而抑制蛋白质的表达。

    反义寡核苷酸包括反义DNA、反义RNA和酶性RNA。作用原理是:①AS-ODNs与DNA结合,抑制DNA复制和转录;②AS-ODNs与mRNA前体结合,阻断RNA加工、成熟,影响核糖体沿mRNA移动;③激活RNase剪切杂交链中未配对的碱基。

    反义寡核苷酸技术具有明显的优点:
    (1)反义核酸是针对特定的靶mRNA(DNA)的序列,基因序列已知;
    (2)反义核酸仅有15-30个碱基,结构简单,容易设计和体外大量合成。
    (3)反义核酸进入细胞内与细胞周期无关,既可进入增殖期细胞又可进入非增殖期细胞。
    反义寡核苷酸技术主要应用于基因的功能研究,以及临床的基因治疗。

SUNBIO为您提供以下服务
    ● 设计并合成干扰siRNA序列,设计并合成正义及反义寡核苷酸序列;
    ● 获得siRNA核酸或构建siRNA表达载体;
    ● 根据您的要求进一步转染哺乳动物细胞;
    ● 检测抑制效果:荧光定量PCR检测mRNA表达情况、Western Blot、IHC检测蛋白表达情况。
    ● 提供实验报告:siRNA序列、反义寡核苷酸序列、构建载体的测序报告;荧光定量PCR检测报告、Western Blot及IHC图片等。

特别说明
    我们尽量优化选择靶位点,由于并不是每个siRNA都能有效抑制目的基因表达,一般建议您设计三个或三个以上序列。
    本试验收费情况请电话垂询。

公司简介

尚柏生物医学技术(北京)有限公司创建于2000年,已经获得国家经营三类医疗器械许可(证号:京081876)和北京市科学技术委员会认定的高新技术企业(统一编号:0611008A21672)。公司总部位于高校云集的北京市海淀区中关村科技园区,座落于中国铁路建设总公司铁建医院。与军事医学科学院、301医院、305医院等国内外知名的科研单位和医院紧密为邻。2007年7月11日,SUNBIO正式被北京中医药大学授权为"国家基础医学与生命科学人才培养实训基地",SUNB IO不断积累和总结实习带教经验,使学生的理论知识和人生阅历通过SUNBIO这个平台得到实践和丰富。SUNBIO将不断加强实训基地的基础设施和人才队伍的建设,逐步完善实习教学模式,争取成为更多基础医学、生命科学教学示范单位的人才培养基地。

尚柏生物致力于尖端免疫学和分子生物学技术在科研中的应用与推广,专业从事免疫检测及其他相关产品的引进、服务和研发。目前已经拥有自主知识产权专利产品6项。尚柏生物公司是一家深受客户信任的高质量服务供应商,通过高度细分、全方位的服务平台,向生物制药和医疗仪器公司提供生物医学产品测试,合同研究及开发,以及生物 cGMP 生产服务。

SUNBIO生命科学实验中心作为尚柏生物的核心技术平台,由加拿大籍华人投资人民币800万元,拥有专业的实验室、洁净的动物房和一流的实验设备(实验室总面积达200平方米拥有仪器设备20余台,较大型仪器设备有:荧光定量PCR仪器、CO2培养箱、超低温冰箱、荧光显微镜、高速冷冻离心机、PCR仪、垂直电泳仪、自动生化分析仪、紫外分光光度计、酶标仪、超净工作台等)和经验丰富的技术人员,其中助理研究员(博士)4人,实验师(硕士)12人,已经发表的SCI文章6篇,国家核心期刊文章20余篇,完整的实验记录多达5000多份。科研项目涵盖临床医学、免疫学、细胞生物学、分子生物学等生命科学诸多领域,具体的实验方法有:普通PCR、荧光定量PCR(real-time PCR)、Western印迹、流式、ELISA、免疫组化、细胞培养、MTT、放免、实验动物饲养及造模等。同时本实验室人员有丰富的新药研发企业工作经验,能够承担新药药效学及毒理学实验,提供新药申报资料、文献查询及综述内容的整理服务。

SUNBIO生命科学翻译中心作为尚柏生物旗下全资子公司,专门从事医学、医药类口笔译的专业化翻译公司长期以来,SUNBIO翻译中心为卫生部、药品监督管理局下属多家单位及多家著名跨国医药企业提供口、笔译服务,获得一致好评。SUNBIO翻译中心以国内知名医科、药科院校,科研院、研究所翻译专家、教授,医学博士,药学博士及外籍(美、英、德、日、韩等)专家为主要依托,云集国内中西医专业翻译人才,以及国外留学回国人员,致力于国内外中西医基础理论、医疗、制药、生物技术、医疗器械、化妆品、食品卫生、兽医等医药相关行业的专业化翻译服务。SUNBIO翻译中心可提供英、日、韩、法、德、俄、意、西班牙等十余种语言的口译、笔译服务。SUNBIO翻译中心坚持奉行“专业、严谨、快捷”的宗旨,凭借装备精良的专业化翻译队伍,以SUNBIO严谨的作风,为客户提供快捷、足不出户的翻译产品和服务。SUNBIO翻译中心视质量为企业生存之根,效率为生存之本,按照GB/T19002-1994 idt IS9002:1994 标准的要求,建 立了先进的质量管理体系和内部管理制度,并全面运用全球最先进的塔多思(TRADOS)翻译记忆软件,以及Freehand、Pagemaker、CorelDraw等制图排版软件,竭诚为海内外广大客户提供最佳的专业化翻译产品和高品质的翻译服务。

公司充分依托装备精良的研究平台,结合自身的技术优势和精良的人力资源,始终不懈的跟踪生命科学领域发展的最前沿。目前,公司承担众多科研院校的国家863、973等科研项目的技术服务,通过我们的高效服务,全国众多客户在EJP, JBC等杂志上发表了影响因子较高的SCI论文。协助近百名研究生进行科研选题和课题合作服务,这些研究生在毕业答辩时都获得了答辩组专家好评,其中一位已获得全国优秀博士论文荣誉。

我们所做的一切都是为了使您的工作更轻松、更快捷。良知使我们不断拿出和引进更好的产品,控制和降低各种成本,为您的研究加油,加速我国自有成果的开发,最终摆脱对进口产品的依赖。这是一项长期艰苦的工作,这是一项光荣伟大的工作,这是我们继续发展的动力。


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