测序/合成

DNA甲基化分析

基本信息
服务名称:
DNA甲基化分析
英文名称:
DNA甲基化分析
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总点击数:
1645
更新日期:
2009-09-15
服务类别:

服务详情
DNA甲基化分析


甲基化特异性PCR(MSP)

      甲基化是在DNA甲基转移酶(DNA Methyltransferase, DNMT)催化作用下,利用S-腺苷甲硫氨酸(S-adenosylmeth
ionine,SAM)提供甲基,在CpG二核苷酸中胞嘧啶嘧啶环的五号碳原子上加上甲基的共价修饰过程.

      DNA甲基化是表观遗传修饰的主要方式,它不改变DNA的一级结构,却在细胞的发育、基因的表达、及基因组的稳定性中起着重要的作用。CpG岛的高甲基化是肿瘤中存在的普遍现象,而启动子CpG岛的高甲基化是除突变和缺失外肿瘤中抑癌基因失活的第三种机制。

      因此,基因启动子甲基化检测在临床诊断(如甲基化检测与低剂量CT相结合)、药物敏感性检测等方面具有很高的应用价值。

      目前甲基化特异性PCR(Methylmion Specific PCR,MSP)及其改进方法是检测基因甲基化的经典方法.MSP法的原理是首先用亚硫酸氢钠修饰处理基因组DNA,所有未发生甲基化的胞嘧啶都被转化为尿嘧啶,而甲基化的胞嘧啶则不变。然后设计针对甲基化和非甲基化序列的引物并进行聚合酶链反应(PCR)扩增,最后通过琼脂糖凝胶电泳分析,确定与引物互补的DNA序列的甲基化状态。MSP法灵敏度较高,应用范围广。
MSP实验流程:

难点:
      1、实验流程长,操作烦琐,不易控制;
      2、起始DNA量不能太多,否则修饰不完全;但量太少,在漫长的修饰、回收过程中容易丢失,所以要求熟练而精细的实验操作。
      3、修饰过程中的pH值要绝对准确、所有试剂要求新鲜配置,并且需要反复摸索找出合适的反映时间。
      4、PCR引物设计、退火温度选择、Taq酶及Buffer的选择都需要不断优化。
 
      总之,在MSP过程中,影响结果的因素比较多,想要得比较好的实验结果,不仅要求高质量的实验试剂,更要求丰富的实验经验和良好的实验习惯。
尚柏生物凭借多年分子生物学实践经验和稳定的技术平台,还有数百例MSP的成功经验,已经建立了甲基化检测的技术体系,并且在临床应用方面与多家医院建立了稳定的合作关系!
使用仪器:美国应用生物系统公司(ABI)VeritiTM梯度PCR仪

公司简介

尚柏生物医学技术(北京)有限公司创建于2000年,已经获得国家经营三类医疗器械许可(证号:京081876)和北京市科学技术委员会认定的高新技术企业(统一编号:0611008A21672)。公司总部位于高校云集的北京市海淀区中关村科技园区,座落于中国铁路建设总公司铁建医院。与军事医学科学院、301医院、305医院等国内外知名的科研单位和医院紧密为邻。2007年7月11日,SUNBIO正式被北京中医药大学授权为"国家基础医学与生命科学人才培养实训基地",SUNB IO不断积累和总结实习带教经验,使学生的理论知识和人生阅历通过SUNBIO这个平台得到实践和丰富。SUNBIO将不断加强实训基地的基础设施和人才队伍的建设,逐步完善实习教学模式,争取成为更多基础医学、生命科学教学示范单位的人才培养基地。

尚柏生物致力于尖端免疫学和分子生物学技术在科研中的应用与推广,专业从事免疫检测及其他相关产品的引进、服务和研发。目前已经拥有自主知识产权专利产品6项。尚柏生物公司是一家深受客户信任的高质量服务供应商,通过高度细分、全方位的服务平台,向生物制药和医疗仪器公司提供生物医学产品测试,合同研究及开发,以及生物 cGMP 生产服务。

SUNBIO生命科学实验中心作为尚柏生物的核心技术平台,由加拿大籍华人投资人民币800万元,拥有专业的实验室、洁净的动物房和一流的实验设备(实验室总面积达200平方米拥有仪器设备20余台,较大型仪器设备有:荧光定量PCR仪器、CO2培养箱、超低温冰箱、荧光显微镜、高速冷冻离心机、PCR仪、垂直电泳仪、自动生化分析仪、紫外分光光度计、酶标仪、超净工作台等)和经验丰富的技术人员,其中助理研究员(博士)4人,实验师(硕士)12人,已经发表的SCI文章6篇,国家核心期刊文章20余篇,完整的实验记录多达5000多份。科研项目涵盖临床医学、免疫学、细胞生物学、分子生物学等生命科学诸多领域,具体的实验方法有:普通PCR、荧光定量PCR(real-time PCR)、Western印迹、流式、ELISA、免疫组化、细胞培养、MTT、放免、实验动物饲养及造模等。同时本实验室人员有丰富的新药研发企业工作经验,能够承担新药药效学及毒理学实验,提供新药申报资料、文献查询及综述内容的整理服务。

SUNBIO生命科学翻译中心作为尚柏生物旗下全资子公司,专门从事医学、医药类口笔译的专业化翻译公司长期以来,SUNBIO翻译中心为卫生部、药品监督管理局下属多家单位及多家著名跨国医药企业提供口、笔译服务,获得一致好评。SUNBIO翻译中心以国内知名医科、药科院校,科研院、研究所翻译专家、教授,医学博士,药学博士及外籍(美、英、德、日、韩等)专家为主要依托,云集国内中西医专业翻译人才,以及国外留学回国人员,致力于国内外中西医基础理论、医疗、制药、生物技术、医疗器械、化妆品、食品卫生、兽医等医药相关行业的专业化翻译服务。SUNBIO翻译中心可提供英、日、韩、法、德、俄、意、西班牙等十余种语言的口译、笔译服务。SUNBIO翻译中心坚持奉行“专业、严谨、快捷”的宗旨,凭借装备精良的专业化翻译队伍,以SUNBIO严谨的作风,为客户提供快捷、足不出户的翻译产品和服务。SUNBIO翻译中心视质量为企业生存之根,效率为生存之本,按照GB/T19002-1994 idt IS9002:1994 标准的要求,建 立了先进的质量管理体系和内部管理制度,并全面运用全球最先进的塔多思(TRADOS)翻译记忆软件,以及Freehand、Pagemaker、CorelDraw等制图排版软件,竭诚为海内外广大客户提供最佳的专业化翻译产品和高品质的翻译服务。

公司充分依托装备精良的研究平台,结合自身的技术优势和精良的人力资源,始终不懈的跟踪生命科学领域发展的最前沿。目前,公司承担众多科研院校的国家863、973等科研项目的技术服务,通过我们的高效服务,全国众多客户在EJP, JBC等杂志上发表了影响因子较高的SCI论文。协助近百名研究生进行科研选题和课题合作服务,这些研究生在毕业答辩时都获得了答辩组专家好评,其中一位已获得全国优秀博士论文荣誉。

我们所做的一切都是为了使您的工作更轻松、更快捷。良知使我们不断拿出和引进更好的产品,控制和降低各种成本,为您的研究加油,加速我国自有成果的开发,最终摆脱对进口产品的依赖。这是一项长期艰苦的工作,这是一项光荣伟大的工作,这是我们继续发展的动力。


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