多肽合成
当前化学合成多肽的方法主要有两种,即 Fmoc 和 t Boc ;由于 Fmoc 比 tBoc 存在更多优势,所以现在较流行的是 Fmoc 法。多肽合成是一个重复添加氨基酸的过程,合成方向是从 C 端(羧基端)向 N 端(氨基端)进行;过去多肽合成大多是在液相中进行,现在大多采用固相合成,从而大大的降低了每步产品提纯的难度;为了防止副反应的发生,合成柱和添加的氨基酸的侧链都是预先被保护的,只有羧基端是游离的,并且在反应之前必须先用化学试剂活化它. 具体合成步骤如下:
1 、去保护: Fmoc 保护的柱子和单体必须用一种碱性溶剂( piperidine )去除氨基的保护基团。(如图 1 )
2 、激活和交联:下一个氨基酸的羧基被一种激活剂所激活溶解,激活的单体与游离的氨基在交联剂的作用下交联,形成肽键。(如图 2 )
3 、循环:这两步反应反复循环直到整条肽链合成完毕。
4 、洗脱和脱保护:根据肽链所含的残基不同,用不同的脱树脂溶剂从柱上洗脱下来,其保护基团被一种脱保护剂( TFA )洗脱和脱保护。
肽链的设计:http://www.shinegene.org.cn/service/serv002.html
上海闪晶分子生物科技有限公司
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