transwell 细胞迁移与侵袭实验将Transwell小室放入培养板中，小室内称上室，培养板内称下室，上下层培养液以聚碳酸酯膜相隔，将研究的细胞种在上室内，由于聚碳酸酯膜有通透性，下层培养液中的成分可以影响到上室内的细胞，应用不同孔径和经过不同处理的聚碳酸酯膜，就可以进行共培养、细胞趋化、细胞迁移、细胞侵袭等多种方面的研究。

一、肿瘤细胞侵袭实验（transwell）
原理：
模仿体内细胞外基质，细胞只有分泌基质金属蛋白酶（MMPs），降解基质胶才可进入下室。
 
步骤
1.  Transwell小室准备
1）无基质胶Transwell小室制备
A. 包被基底膜：
A. Matrigel (50mg/L)按1:8稀释，无血清培养基作为稀释液
B. 取适量加入Transwell小室中(24孔板transwell小室加100 ul)，4℃操作。
C. 37℃培养箱中，孵育4-5h（>5h）；出现“白色层”时，说明已经变为固态。
 
2）有基质胶Transwell小室制备
A. 小室放入培养板中，上室加入300µl预温的无血清培养基
B. 室温下静置15－30min，使基质胶再水化
C. 再吸去剩余培养液。
二、肿瘤细胞迁移实验（Transwell）
过程与Transwell侵袭实验基本一致，不同的只是不需要铺Matrigel。
步骤
1.Transwell放入预先每孔加有600ul的培养基（含10%血清）的24孔板内，
2.在Transwell的内室加入细胞（100ul,用含0.1%血清的培养基稀释到所需密度），
3.放入细胞培养箱，培养一定时间后取出。
4.取出Transwell，用棉签擦去膜（内室一侧）的细胞
5.另一面的细胞用甲醛室温固定30分钟
6. 结晶紫染色20分钟，
7. PBS或清水洗3次，
8.显微镜下观察细胞，记数。

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