分子与细胞

LDR-PCR测序分型技术/SNP分型/遗传多态性检测

基本信息
服务名称:
LDR-PCR测序分型技术/SNP分型/遗传多态性检测
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3497
更新日期:
2024-09-27
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服务详情

1. 技术原理

 

 

1.1.  连接酶检测反应 (Ligase Detection Reaction,LDR)

LDR是利用高温连接酶实现对基因多态性位点的识别。高温连接酶一旦检测到DNA与互补的两条寡聚核苷酸接头对应处存在着基因点突变类型的碱基错配,则连接反应就不能进行。

如下图:右边的探针与模板有一个碱基不配对,所以连接反应不能进行,没有连接产物;左边的探针与模板DNA完全互补,故进行连接反应。通过温控循环该特异性连接反应可反复进行,达到线性扩增的效果。

 

1.2.  测序分型方法

测序分型原理如下图:(1) 本技术方案先通过多重PCR (Multiplex PCR)获得含有待检测突变位点的基因片断,然后进行多重LDR (Multiplex LDR),最后通过测序仪电泳读取检测结果;(2) 检测结果表明,左边位点,即突变位点一为A/C杂合子,右边位点,即突变位点二为T纯合子。

 

2. 操作流程

2.1. 抽提基因组DNA

例:基因组DNA抽提结果电泳图 

 

2.2. 多重PCR扩增

例:多重PCR产物电泳图


      

2.3. 多重LDR反应 

2.4. 测序胶电泳检测

公司简介
上海翼和应用生物技术有限公司是上海市高新技术企业,上海市遗传学会理事单位,至今已有十九年历史。公司具备ISO9001与CMA资质,上海翼和专家团队富有开创精神,朝气蓬勃,秉承“专业、协作、进取”的企业精神,为国内科研工作者和生物医药企业提供细胞质控类、健康检测类与科研技术类的服务与产品。
翼和专注为工业客户提供:细胞STR鉴定,种属鉴定,PDX模型质控,支原体检测服务/试剂盒,端粒长度检测/试剂盒,端粒酶活性检测/试剂盒等服务及产品。为科研客户提供:实验大小鼠遗传背景鉴定,线粒体拷贝数变异检测,超高重SNP分型检测,目标区间重测序,目标区域甲基化测序等服务。

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