双荧光素酶报告基因检测服务
由于萤火虫荧光素酶和海肾荧光素酶的催化底物和发光颜色不同，且光吸收波长不同，可在互不干扰的情况下进行检测，此外，在哺乳动物体内两种酶均无内源性表达，因此作为双荧光素酶报告基因系统得到广泛使用。在双荧光素酶检测中，通常以萤火虫荧光素酶为实验报告基因，以海肾荧光素酶为对照报告基因，以减少细胞活性、转染效率等外在变化因素对实验准确性的影响。
双荧光素酶报告基因系统凭借灵敏度高、检测范围广、方便快速的优势，已成为基因转录调控、启动子结构分析、启动子SNP分析和非编码RNA靶向互作等研究的重要手段。
服务内容一：启动子与转录因子互作检测
将靶启动子片段插入到萤火虫荧光素酶表达序列上游，构建实验报告基因质粒，将要检测的转录因子表达质粒与两种报告基因质粒共转染相关细胞；经细胞培养后裂解细胞，离心取上清，随后分别加入两种荧光素酶底物，荧光素酶与底物反应产生荧光，通过检测荧光的强度测定荧光素酶的活性，从而判断转录因子是否与该启动子存在相互作用。
备注：如果转录因子能够激活靶启动子，则萤火虫荧光素酶基因就会表达，且萤火虫荧光素酶的表达水平与转录因子的作用强度成正比。
服务内容二：miRNA-靶基因调控验证
miRNA通过识别mRNA的3’UTR区，诱导细胞内沉默复合体介导的mRNA降解或抑制mRNA的翻译过程。将野生型或突变型待测靶基因的3’UTR序列构建至萤火虫荧光素酶基因的3’端，将两个报告基因质粒与miRNA在细胞内共表达，通过比较萤火虫荧光素酶报告基因表达活性的改变，验证miRNA对靶基因的调控作用。
备注：若萤光素酶的活性降低，提示miRNA可能参与抑制靶基因的表达。
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