Southern Blot
方法步骤
以哺乳动物基因组DNA为例,介绍Southern印迹杂交的基本步骤
1、 待测核酸样品的制备
2、 琼脂糖凝胶电泳分离待测DNA样品
3、电泳凝胶预处理
4、转膜
5、探针标记
6、预杂交(prehybridizafion)
southern印迹杂交实验仪器
7、Southern杂交
8、洗膜
9、放射性自显影检测
结果注意
在膜上阳性反应呈带状。实验中应注意以下问题:转膜必需充分,要保证DNA已转到膜上。杂交条件及漂洗是保证阳性结果和背景反差对比好的关键。洗膜不充分会导致背景太深,洗膜过度又可能导致假阴性。若用到有毒物质,必需注意环保及安全。
主要应用
1.遗传病诊断
2.DNA图谱分析
3.PCR产物分析
服务周期 45个工作日
我公司专业提供定量pcr、wb免疫组化、免疫荧光、elisa细胞培养文库构建等技术服务。
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