GABA离子通道检测
详细说明
1.背景:
GABAA受体(又称作γ-氨基丁酸A型受体)是一种离子型受体,而且是一类配体门控型离子通道。GABA是中枢神经系统里的一种主要的抑制性递质,GABAA受体被激活后,可以选择性的让Cl-通过,引起神经元的超极化。GABAA受体分为5个亚型,其分布及功能个于不同。本研究的目的在于建立GABA配体门控通道研究平台,为GABA相关药物筛选及研究提供依据。
已经建立的GABA 研究平台包括:
基于培养原代神经元的GABA研究以及基于GABA-HEK293重组配体门控通道的研究。
爱思益普已建立的GABA-HEK293重组通道包括:
GABAA1 α1β2γ2
GABA A2 α2β3γ2
GABAA3 α3β2γ3
GABAA4 α4β2γ3
GABAA5 α5β3γ2
2.材料与方法:
全细胞膜片钳技术
细胞内液(mM):CsCl 130, CaCl2 0.1, MgCl2 2, EGTA1.1, Na2ATP 5 以及 HEPES 10
pH=7.15, CsOH调节
细胞外液(mM):NaCl 140, CsCl 5, CaCl2 2, MgCl2 1, HEPES 5 以及Glucose 10
pH=7.35, NaOH调节
形成全细胞记录模式之后, 将细胞膜电位牵制在-70mV, 稳定后利用给药系统将激动剂快速作用于细胞, 引发出GABA电流
3.结果:
3.1 海马原代神经元GABA配体门控通到电流
3.2 基于GABA-HEK293重组通道的GABA筛选
例:GABAA2 IC50 ---- bicuculine
北京爱思益普生物科技有限责任公司是归国留学人员创办的技术型创业企业,位于北京中关村生命科技园区,是一家以药物合同研发为主要业务的生物科技公司。北京爱思益普生物科技有限责任公司是国内首家致力于离子通道相关的药物合同研发企业,是国内离子通道药物研究的先行者。公司建立了与hERG钾通道相关的药物心脏安全性筛选研究以及基于细胞和分子水平的心血管系统、神经系统离子通道药物发现性研究的筛选平台。同时,我们还致力于为顾客提供高质量,个性化的功能性检测模型建立和药物筛选服务,如GPCR,蛋白酶/蛋白激酶,ADME,体外细胞毒,以及药效学,毒理学等服务。我们的管理及技术团队均具有海外工作经历,所有的项目负责人均有欧洲或北美的博士学位。我们以高效,可靠的离子通道药物研究,药物高通量筛选以及药理学研究为全球制药业服务。我们我们致力于提供优质,灵活的方式,通过定制标准化的药理学研究提供高效率和低成本的服务,所有的实验均遵守GLP规范的要求。我们建立了以客户为中心的专业研发团队,以满足客户的研究需求。
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