环境微生物群落多样性分析,16S/18S/ITS扩增子测序
16S rDNA是细菌染色体上编码16S rRNA相对应的DNA序列,存在于所有细菌染色体基因中。共包括9个可变区和10个保守区,保守序列区域反映了生物物种间的亲缘关系,而高变序列区域则能体现物种间的差异。通过对16S rDNA中某个可变区进行测序,可以对特定环境下的细菌和古菌进行微生物群落多样性的鉴定。
18S rDNA是编码真核生物核糖体小亚基rRNA(18SrRNA)的DNA序列,序列中既有保守区又有可变区。由于18SrDNA在进化速率上比较保守,可以检测特定环境下的真菌群落多样性。
内转录间隔区ITS是位于真菌核糖体DNA(rDNA)上18S 和28S 基因之间的区域片段,主要包括内转录间隔区1(ITS1)、5.8S rDNA、内转录间隔区2(ITS2),其两侧分别是18S RNA 基因和28S RNA 基因。ITS序列由于选择压力小,因此在进化过程中能够承受更多的变异,也可用于检测特定环境下的真菌群落多样性。
生物信息分析内容
1、数据质控
2、Paired-end reads拼接成Tags
3、去除嵌合体
4、OTUs聚类及物种注释
5、物种组成和丰度统计
6、Alpha多样性分析
7、Beta多样性分析
8、主成分分析(PCA分析)/主坐标分析(PCoA分析)
9、多元统计分析(T-test、Metastat分析、LEfSe分析、Anosim和MRPP分析)
技术参数
样本类型及要求:
(1)基因组DNA,总量≥200 ng,浓度≥5 ng/μL
(2)PCR产物,总量≥400 ng,浓度≥20 ng/μL
文库类型:扩增子文库
测序策略:HiSeq PE250,推荐数据量:3W条raw tags
项目周期:40个工作日
结果示例
OTU维恩图
各分类层级丰度前十堆积条形图
丰度前20属物种分类树
物种构成krona图
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本公司的核心技术团队由在分子生物学、大规模测序、生物信息学、临床医学等领域的做出突出贡献的专家组成,他们在国内外具有相当的知名度和学术影响力。该团队在国际上首次建立了一系列基于大规模测序的高精度实验与应用技术,可以为科研和医疗领域的单位客户或个人客户提供方便快捷、准确详尽、高度定制化的大规模精确测序与信息分析服务。
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