DNA 测序服务
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DNA测序原理
DNA测序技术主要依据 Sanger 的双脱氧链终止法。以DNA单链为模板,在特定条件下,用特异的引物在测序级DNA聚合酶的作用下,根据碱基互补配对原则,不断将 4 种脱氧核糖核苷酸 (dNTP) 加到引物的 3'- 羟基末端并使引物链得到延伸。这种链的延伸是通过引物的 3'- 羟基和脱氧核糖核苷酸底物的 5'- 磷酸基团形成磷酸二酯键来完成的。如果这种反应体系中加入双脱氧核糖核苷酸 (ddNTP) ,这种 2'3'ddNTP 的 5'- 磷酸基团是正常的 (4 种不同的荧光标记 ) ,而 3' 位置缺少羟基,因此在 DNA 聚合酶作用下,仍然可以通过 5'- 磷酸基团与引物链的 3'- 羟基反应掺入到引物链中,但是由于 ddNTP 没有 3'- 羟基,不能继续与下一个 5'- 磷酸基团形成磷酸二酯键而导致引物链延伸的终止。这样,在测序反应体系中, DNA 引物链不断合成与偶然终止,产生一系列的长短不等的核苷酸链,然后将这些反应产物进行电泳,即可得测序图谱。
样品要求
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样品类型 |
相应要求 |
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菌体 |
1. 说明载体抗性类型,我们提供 Amp, Kan, Tet 及 Chl 四种抗生素。 |
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质粒 |
1. 质粒溶于适量体积双蒸水中(不含 TE ),电泳检测总量大于 2mg 。 2. 建议用相关试剂盒纯化。 |
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未纯化 PCR 产物 |
1. 片段大于 150bp 。 |
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纯化 PCR 产物 |
1.PCR 产物溶于双蒸水中(不含 TE )。 2. 浓度大于 20ng/ul ,体积大于 20ul ,长片段需适当增加量。 |
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自备的引物 |
1. 浓度不低于 5pmole/ul( 或 5umol/L) ,体积大于 20ul 。 |
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上海闪晶分子生物科技有限公司,座落在漕河径开发区(原址:上海生物工程研究院),是专业从事生物技术服务的公司;公司拥有一批知名度较高的学科带头人和一支训练有素、多学科配合、以中青年科技人员为主的研究队伍。公司自研究所改制以来在分子生物学试剂盒、荧光定量PCR、siRNA载体构建、全基因合成拼接、荧光探针修饰、多肽合成、dNTP、Pfu酶、热启动Taq酶、DNA marker、基因工程、原生质体的培养、细胞融合、单克隆抗体诊断试剂等研究方向作了深入的研究; |
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公司拥有从事基因工程、细胞工程、单克隆抗体研究的现代化实验室和先进的精密设备,如:实时PCR 扩增仪、多肽合成仪、 DNA 合成仪、 DNA 序列分析仪、 FPLC 、高压液相色谱仪、冻干机、 CO2 培养箱、大型摇床等。 |
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上海闪晶生物自2004年成立以来,一直致力于“如何将科研技术转化成生产力”的工作,可喜的是闪晶公司在短短的几年内已经成功地完善了一系列的服务项目和试剂盒;公司始终坚持自己的理念:“专业公司,打造专业服务”。如果你有新的技术、新的项目或产品,需要合作转化,请与我们联系。 |
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