实验介绍

数字 PCR（Digital PCR或dPCR）作为传统实时定量 PCR 的替代方法，可以实现绝对定量及稀有等位基因的检测。 数字 PCR 的工作原理在于将 DNA 或 cDNA 样品分割到几十、几万个单独、平行的 PCR 反应（将样品稀释到单分子水平），这些反应中有的包括靶标分子（阳性），有的不包含（阴性）。 单个分子可以被扩增一百万倍或更多，数字PCR在扩增结束后对每个反应单元的荧光信号进行采集，当不存在任何靶标序列时，没有信号累积，阴性反应片段用于生成样品中靶标分子的绝对计数。此方法的优点：1）不依赖于扩增曲线的循环数，不受扩增效率的影响；2）不需要内参基因；3）绝对定量不需要标准曲线；4）很好的准确性及重现性。基于上述优点，数字PCR被越来越多的用于分子生物学检测，如突变/稀有变异检测、拷贝数变异检测、肿瘤组织核酸分析、基因表达分析、线粒体拷贝数与突变分析，同时还可以用于NGS的结果验证。

服务流程

客户提供

●   细胞样本：细胞悬液（≥10^6）或冻存团块

●   组织样本：新鲜样本或液氮保存样本（≥300mg）

●   血液样本：≥1ml

●   核酸样品：DNA或RNA冻存样本（≥1μg，-80度保存6个月以内）

●   基因名称或序列号

服务优势

●   高纯度的核酸提取技艺

●   专业的特异性引物设计方案

●   先进的数字PCR仪

●   标准化的dPCR操作流程

●   真实清晰完整的报告呈现

北京健坤禾润科技有限公司（以下简称“健坤禾润”）成立于2011年4月，是一家提供专业医学科研服务咨询及技术服务的转化医学平台。

健坤禾润建有标准化的实验室，独立拥有一系列先进的硬件设施，包括confocal、流式仪、发光检测仪、MD酶标仪、实时定量PCR仪、独立细胞室、荧光显微镜等，并开展各种细胞原代分离、细胞处理、分子生物学、免疫生物学等研究，在细胞生物学、免疫学、分子生物学、蛋白质组学等领域已形成了专业优势。

健坤禾润拥有博士后、博士等一批专注于机制研究的科研人员。除单项技术服务之外，健坤禾润还可以为广大临床客户和科研工作者提供转化医学整体项目的方案设计、实验实施、数据分析、报告总结等一站式科研咨询和技术服务，目前我们已经与全国知名三甲医院、高校和科研院所建立了长期技术合作关系。

健坤禾润密切关注和跟踪国内外各个医学学科的研究动态与进展，用科研机制的方式验证、阐述疾病机理，提升科研的创新性和连续性。

服务内容涉及

分子生物学

qPCR；定点突变；多重PCR；数字PCR；SNP分型；核酸提取与纯化；基因克隆与表达质粒的构建

细胞生物学

细胞活力/增殖/凋亡/周期；细胞分离培养；荧光素酶报告基因试验；CRISPR/Cas9（细胞）；细胞转染/稳定细胞株构建；细胞共培养；细胞及亚细胞形态结构观测；EMT相关检测

免疫生物学

免疫组织化学（IHC）; ChIP/ChIP-seq/EMSA；Western-Blotting；免疫荧光（IF）；原位杂交（In Situ Hybridization）；IP/CoIP/CoIP-MS；酶联免疫吸附反应（ELISA）

蛋白质组学

蛋白芯片检测；蛋白质谱鉴定与序列测定；iTRAQ；双向凝胶电泳

官网：http://www.jkgreentech.com/

联系电话：010-88857418/19

地址：北京市大兴区生物医药基地天荣大街19号7栋五层
邮编：102600
乘车路线：地铁4号线生物医药基地站西南口出，沿永兴路步行至天荣大街，向南行500m，化大天荣院内南楼五层