实验介绍

基因克隆

指发生在基因水平上的分子克隆（DNA克隆），即将编码某一多肽或蛋白质的基因（外源基因）组装到细菌质粒（克隆载体）中，再将该重组质粒转入大肠杆菌体内，使其随大肠杆菌增殖而进行复制。由于质粒具有不相容性，即同一类群的不同质粒不能在同一菌株内稳定共存，当细胞分裂时就会分别进入到不同的子代细胞，因此来源于一个菌株的质粒是一个分子克隆，而随质粒复制出的外源基因也就是一个分子克隆。DNA插入片段获得途径有逆转录-PCR、文库筛选、人工合成（适合小片段基因）。

真核表达质粒构建

将目的基因片段（1.cDNA文库；2.人工合成；3.PCR产物）通过合适的酶切位点构建到相应真核表达载体中，通过细胞转染的方式在真核宿主细胞内最终实现目的基因的表达。

服务流程

客户提供

●   基因名称或序列号

●   逆转录-PCR方法合成cDNA需要提供细胞或组织样本

服务优势

●   系统化的目的片段制备方案

●   专业化的基因克隆平台

●   高效的表达质粒构建流程

●   真实清晰完整的报告呈现

北京健坤禾润科技有限公司（以下简称“健坤禾润”）成立于2011年4月，是一家提供专业医学科研服务咨询及技术服务的转化医学平台。

健坤禾润建有标准化的实验室，独立拥有一系列先进的硬件设施，包括confocal、流式仪、发光检测仪、MD酶标仪、实时定量PCR仪、独立细胞室、荧光显微镜等，并开展各种细胞原代分离、细胞处理、分子生物学、免疫生物学等研究，在细胞生物学、免疫学、分子生物学、蛋白质组学等领域已形成了专业优势。

健坤禾润拥有博士后、博士等一批专注于机制研究的科研人员。除单项技术服务之外，健坤禾润还可以为广大临床客户和科研工作者提供转化医学整体项目的方案设计、实验实施、数据分析、报告总结等一站式科研咨询和技术服务，目前我们已经与全国知名三甲医院、高校和科研院所建立了长期技术合作关系。

健坤禾润密切关注和跟踪国内外各个医学学科的研究动态与进展，用科研机制的方式验证、阐述疾病机理，提升科研的创新性和连续性。

服务内容涉及

分子生物学

qPCR；定点突变；多重PCR；数字PCR；SNP分型；核酸提取与纯化；基因克隆与表达质粒的构建

细胞生物学

细胞活力/增殖/凋亡/周期；细胞分离培养；荧光素酶报告基因试验；CRISPR/Cas9（细胞）；细胞转染/稳定细胞株构建；细胞共培养；细胞及亚细胞形态结构观测；EMT相关检测

免疫生物学

免疫组织化学（IHC）; ChIP/ChIP-seq/EMSA；Western-Blotting；免疫荧光（IF）；原位杂交（In Situ Hybridization）；IP/CoIP/CoIP-MS；酶联免疫吸附反应（ELISA）

蛋白质组学

蛋白芯片检测；蛋白质谱鉴定与序列测定；iTRAQ；双向凝胶电泳

官网：http://www.jkgreentech.com/

联系电话：010-88857418/19

地址：北京市大兴区生物医药基地天荣大街19号7栋五层
邮编：102600
乘车路线：地铁4号线生物医药基地站西南口出，沿永兴路步行至天荣大街，向南行500m，化大天荣院内南楼五层