分子与细胞

泛素化定量蛋白组学研究

基本信息
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泛素化定量蛋白组学研究
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2313
更新日期:
2023-11-16
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BTP-泛素化定量蛋白组学研究

 

泛素化修饰是一种重要的翻译后修饰。泛素-蛋白酶体系统介导了真核生物体内80%~85%的蛋白质降解。此外,泛素化修饰还可以直接影响蛋白质的活性和定位,调控包括细胞周期、细胞凋亡、转录调控、DNA 损伤修复以及免疫应答等在内的多种细胞活动。

百泰派克公司采用Thermo Fisher的Q ExactiveHF质谱平台,Orbitrap Fusion质谱平台,Orbitrap Fusion Lumos质谱平台结合Nano-LC,推出泛素化定量蛋白组分析服务技术包裹,您只需要将您的实验目的告诉我们并将您的样品寄给我们,我们会负责项目后续所有事宜,包括蛋白提取、蛋白酶切、泛素化肽段富集、肽段分离、质谱分析、质谱原始数据分析、生物信息学分析。

由于翻译后修饰的蛋白质在生物样本中含量低、动态范围广,质谱分析前需要对修饰进行富集以提高其丰度,然后利用传统的定量蛋白组分析手段对富集得到的泛素化肽段样品进行定量分析。百泰派克公司基于发表在Nature Protocol上的文章:Large-scale identification of ubiquitination sites by mass spectrometry建立了该分析服务的实验平台,采用完全复制的方式;首先对泛素化的蛋白进行胰酶消化,在赖氨酸的修饰位点上会产生两个甘氨酸的残基(K-GG),利用CST公司提供的针对该残基的试剂盒对泛素化肽段进行特异性的富集。我们使用HPLC对样品进行预分离,再使用抗特殊残基结构的抗体进行泛素化肽段的富集,极大地提高了泛素化蛋白的鉴定量。同时,在Nature Protocl文章基础上,为了鉴定和定量更多的乙酰化肽段,我们在酶切过程中会使用2-3中不同的酶对蛋白样品进行酶切,保证带有乙酰化位点的肽段以高离子化效率的方式进入质谱进行分析,排除因为肽段长度不合适、离子化效率低造成的乙酰化信息的丢失。

泛素化修饰研究路线

BTP-泛素化定量蛋白组学研究分析样品要求

1. 如果您提供的是组织样品,请您干冰将组织样品寄给我们;植物组织样本大于400mg,血液样品至少2ml(血浆注意用EDTA防凝),血清2ml,尿液10ml,动物组织样品至少2g,细胞样品为1X10^8个细胞,酵母、微生物等干重400mg。

2. 如果您提供的是蛋白样品,请您保证蛋白总量在2-5mg;蛋白提取时使用普通的组织、细胞裂解液即可。

3. 样品运输:请使用足量的干冰运输,并且尽量选用较快的邮递方式,以降低运输过程中样品降解的可能性。

4. 在正式实验之前,我们都会对您提供的样品进行检测,检测合格后开始正式试验。

BTP-泛素化定量蛋白组学研究案例

泛素化修饰研究案例

中/英文项目报告

在技术报告中,百泰派克会为您提供详细的中英文双语版技术报告,报告包括:

1. 实验步骤(中英文)
2. 相关的质谱参数(中英文)
3. 鉴定的泛素化位点的详细信息
4. 质谱图片
5. 原始数据

BTP-泛素化定量蛋白组学一站式服务

您只需下单-寄送样品 百泰派克一站式服务完成:样品处理-上机分析-数据分析-项目报告

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公司简介
百泰派克生物科技--生物制品表征,多组学生物质谱检测优质服务商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于为生物/制药和医疗器械行业提供质量控制检测项目验证
专业服务。公司实验室遵循NMPA、ICH、FDAEMA等的法规和指导原则,通过CNAS/ISO9001
双重质量体系认证
,建立了完备的质量体系,数据冷热/异地备份,设备定期计量/期间核查,软件审
计追踪,为客户提供一体化解决方案和技术服务,支持新药研发药物申报注册生产放行
 
1.公司采用ISO9001质量控制体系,专业提供以质谱为基础的CRO检测分析服务;
2.获国家CNAS实验室认可,为客户提供符合全球药政法规的药物质量研究服务;
3.业务范围覆盖蛋白质组学、多肽组学、代谢组学、生物药物表征、单细胞分析、
单细胞质谱流式、生信云分析以及多组学生物质谱整合分析等;
4.七大质量控制检测平台,满足您一站式服务需求;
5.服务3000+企业,10000+客户的选择;
6.致力于为您提供优质的生物质谱分析服务!

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