分子克隆技术服务-北京密码子生物科技有限公司
分子克隆
分子克隆是将的目的序列从研究的材料中克隆出来，并根据研究意图将目的片段连接到相应的载体中，人为控制基因的表达，辅助探索基因或者目的片段的功能。可以通过购买试剂自己去克隆一段序列，也可以通过基因合成和亚克隆完成载体构建。
分子克隆步骤和常用的试剂梳理如下：
核酸提取→引物合成→PCR及产物回收→TA克隆→亚克隆到目的载体
※ 核酸提取
分子克隆的第一步是要把研究物种的核酸提取出来，高质量的核酸有助于后续分子实验的进行。密码子公司可为您提供动物和植物的核酸提取试剂盒，其中新型植物基因组提取试剂盒可用于多糖多酚植物的基因组提取，如烟草、棉花、桃、梨、苹果、葡萄、等，提取的DNA质量较高且杂质少。
核酸提取的产品：
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品牌 |
货号 |
名称 |
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IMAGENE |
RE104-01 |
RNAliquid超速全血（液体样）总RNA提取试剂盒 |
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IMAGENE |
RE110-01 |
GenePure 组织/细胞RNA快速提取试剂盒 |
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IMAGENE |
RE108-01 |
PLANTpure通用植物总RNA快速提取试剂盒 |
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IMAGENE |
RE120-01 |
GenePure多糖多酚植物RNA快速提取试剂盒 |
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IMAGENE |
DE102-01 |
小量全血基因组DNA快速提取试剂盒（离心柱型） |
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IMAGENE |
DE108-01 |
组织/细胞基因组DNA快速提取试剂盒（带蛋白酶K） |
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IMAGENE |
DE115-01 |
CTAB植物基因组DNA快速提取试剂盒 |
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IMAGENE |
DE117-01 |
新型植物基因组DNA快速提取试剂盒 |
※ 引物合成
引物的纯化方式有RPC（OPC），PAGE，ePAGE，HPLC纯化，根据您的实验类型和实验要求，选择不同的纯化方式，不同纯化方式不同规格的引物费用如下：
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纯化方式 |
碱基范围 |
规格 |
价格 |
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RPC（或者OPC） |
1-14bp |
<25 nmol |
￥15 |
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15～59 base |
1～5 nmol |
￥0.6/bp |
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6～25 nmol |
￥0.8/bp |
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60～89 base |
2 nmol |
￥2.6/bp |
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5 nmol |
￥3.2/bp |
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ePAGE |
15～59 bp |
1～5 nmol |
￥0.8/bp |
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6～10 nmol |
￥1.2/bp |
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PAGE |
15～59 bp |
1～5 nmol |
￥1.0/bp |
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6～10 nmol |
￥1.5/bp |
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60～89bp |
2 nmol |
￥2.8/bp |
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5 nmol |
￥4.2/bp |
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HPLC |
6-14bp |
<25nmol |
￥110 |
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15-59bp |
1～5 nmol |
￥5/bp |
本公司提供的引物显示nmol数，根据提示直接加入相应nmol数x10倍或者x100倍微升的ddH2O即可获得终浓度为100uM或者10uM的引物，方便使用。
例如：引物F管上显示5nmol，加入50uL的ddH2O得到引物终浓度为100uM；若加入500uL的ddH2O引物终浓度为10uM。
欢迎垂询！ 咨询电话：0371-63689755 咨询QQ：2110312070
※ PCR及产物回收
PCR需要的基本材料为核酸模板，引物，dNTPs，DNA聚合酶，相应的Buffer和ddH2O，硬件设施需要PCR仪及相应的运行程序。
其中DNA聚合酶的类型有多种，根据扩增的DNA片段长度和实验类型选择不同类型的DNA聚合酶。
PCR相关产品：
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品牌 |
货号 |
名称 |
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IMAGENE |
PR112-01 |
KOD DNA Polymeras（with HighPure dNTP mix ) |
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IMAGENE |
PR113-01 |
2×KOD PCR MasterMix(with Dye) |
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IMAGENE |
PR114-01 |
Taq DNA Polymerase（Buffer with Mg2+） |
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IMAGENE |
PR116-01 |
Pfu DNA Polymerase（with HighPure dNTP mix) |
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IMAGENE |
PR121-01 |
2×Taq PCR MasterMix (with Dye) |
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IMAGENE |
PR138-01 |
LongAmp PCR Kit (长片段PCR扩增试剂盒) |
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IMAGENE |
PR139-01 |
HifiAmp PCR Kit (高保真PCR扩增试剂盒) |
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IMAGENE |
MD101-01 |
AL2000 DNA Marker |
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IMAGENE |
MD102-01 |
AL5000 DNA Marker |
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IMAGENE |
MD110-01 |
1kb Plus DNA Ladder Marker |
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IMAGENE |
BE101-01 |
琼脂糖凝胶DNA/RNA电泳6×上样缓冲液 |
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IMAGENE |
BE102-01 |
50 ×TAE Buffer |
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IMAGENE |
BE107-01 |
GoldenView（核酸染料） |
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IMAGENE |
BE108-01 |
10000xSybr Green I（核酸染料 电泳级） |
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IMAGENE |
BE109-01 |
AidGreen（等于GelGreen）核酸染料 |
对常见的DNA聚合酶的特点做了总结：常见几种PCR聚合酶的特点.pdf
直接扩增试剂盒：
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品牌 |
货号 |
名称 |
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IMAGENE |
DT101-01 |
组织细胞PCR直接扩增试剂盒 |
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IMAGENE |
DT103-01 |
植物PCR直接扩增试剂盒 |
我公司提供植物、动物的直接扩增试剂盒，可省去提取DNA的繁琐步骤，将DNA提取和PCR步骤合二为一，简单省时。
DNA纯化回收产品
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IMAGENE |
DP101-01 |
琼脂糖凝胶纯化回收试剂盒 |
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IMAGENE |
DP102-01 |
PCR产物纯化回收试剂盒 |
※ TA克隆
分子克隆需要把扩增的产物直接克隆到T载体上，进行测序，之后再把序列正确的亚克隆到目的载体上。
根据选用的DNA聚合酶的类型可确定扩增出的PCR产物是平末端还是带A的粘性末端，以此为依据选用平末端的T载体或者TA克隆的载体。
TA克隆载体及试剂
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品牌 |
货号 |
名称 |
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IMAGENE |
CV102-01 |
零背景pTOPO-TA克隆试剂盒 |
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IMAGENE |
CV103-01 |
零背景pTOPO-TA 克隆试剂盒（不含MCS） |
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IMAGENE |
CV104-01 |
零背景pTOPO-Blunt平末端克隆试剂盒 |
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IMAGENE |
CV105-01 |
零背景pTOPO-Blunt 平末端克隆试剂盒（不含MCS） |
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IMAGENE |
CV106-01 |
一步法无缝克隆试剂盒（单片段克隆） |
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IMAGENE |
CV107-01 |
无缝克隆拼接试剂盒（单/多片段克隆） |
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IMAGENE |
CV114-01 |
DNA快速连接试剂盒 |
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IMAGENE |
CV116-01 |
T4 DNA Ligase |
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IMAGENE |
CC101-01 |
TOP 10感受态细胞 |
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IMAGENE |
CC102-01 |
DH5α感受态细胞 |
※ 亚克隆到目的载体
亚克隆需要将目的载体酶切，在将目的片段和线性化目的载体连接，即可完成载体构建。
目的载体构建需要的试剂产品：
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品牌 |
货号 |
名称 |
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IMAGENE |
PE102-01 |
高纯度质粒小量提取试剂盒（离心柱型） |
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IMAGENE |
CC102-01 |
DH5α感受态细胞 |
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IMAGENE |
PR112-01 |
KOD DNA Polymeras（with HighPure dNTP mix ) |
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IMAGENE |
PR121-01 |
2×Taq PCR MasterMix (with Dye) |
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IMAGENE |
CV106-01 |
一步法无缝克隆试剂盒（单片段克隆） |
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IMAGENE |
CV107-01 |
无缝克隆拼接试剂盒（单/多片段克隆） |
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IMAGENE |
CV116-01 |
T4 DNA Ligase |
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NEB |
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NEB限制性内切酶 |
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GV3101感受态细胞 |
分子克隆的另一种选择-----------基因合成和亚克隆
※ 基因合成和亚克隆
您可以提供载体和基因序列，并指定酶切位点，我们根据您提供的信息合成序列并亚克隆到您指定的任意载体上，且多个载体构建可同时进行，周期固定为3周。
※ 优势：省去PCR扩增、载体酶切和连接、测序的步骤，也省去了试剂耗材费用，更能为您节省时间，交付质粒冻干粉、甘油菌和一份详细的检测报告，您可放心使用。
基因合成和亚克隆价格表
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长度 |
合成 |
亚克隆 |
时间 |
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1-249bp |
￥300/条 |
￥200/个 |
15days |
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<3Kb |
￥1.2/bp |
21days |
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3-10 Kb |
3.5-4.5 Kb |
￥1.5/bp |
35days |
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4.5-6.0 Kb |
41days |
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6.0-10 Kb |
48days |
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>10Kb |
询价 |
咨询 |
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欢迎垂询！ 咨询电话：0371-63689755 咨询QQ：2110312070
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