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酵母双杂交文库构建技术服务

基本信息
服务名称:
酵母双杂交文库构建技术服务
英文名称:
参考报价:
总点击数:
1957
更新日期:
2018-01-30
服务类别:

服务详情
酵母双杂交文库构建技术服务

酵母双杂交文库构建技术服务介绍

酵母双杂交技术产生以来,主要应用在以下几个方向:
1、检验一对功能已知蛋白间的相互作用。
2、 研究一对蛋白间发生相互作用所必需的结构域。
3、 用已知功能的蛋白基因筛选双杂交cDNA文库,以研究蛋白质之间相互作用的传递途径。
4、 分析新基因的生物学功能,即以功能未知的新基因去筛选文库。通常依靠报告基因的转录激活来鉴定蛋白相互作用。将一个基因克隆到"诱饵"载体,并和GAL4蛋白的DNA结合域(DBD)表达为融合蛋白。将第二个基因或者编码可能的相互作用子蛋白的cDNA文库克隆到"猎物"载体,同GAL4的转录激活域(AD)表达为融合蛋白。当两个蛋白相互作用时,AD和DBD间距离被拉近,从而激活报告基因的表达。

本服务项目使用infusion重组系统进行重组,使用专利的cDNA合成方法进行cDNA的合成。  

实验步骤  
  1.1.RNA提取 
  1.2.mRNA分离 
  1.3.cDNA合成(使用酶促法直接合成,不经过PCR扩增过程,比SMART方法质量大大提高) 
  1.4.cDNA长度分级
 1.5.分级后的cDNA与酵母双杂载体(pGADT7、pGADT7-REc2、pDEST22、pB42AD、pPR3N等载体,或者客户指定载体)进行infusion重组。 
  1.6.重组后产物电转化感受态细胞 
  1.7.文库铺板检测与菌液保存 
  1.8.文库质粒提取 
  
产品内容 
  我们提供构建好的酵母文库的甘油菌液(含20%甘油的LB培养基),文库甘油菌,随机克隆子的PCR鉴定图谱,文库构建报告,酵母双杂交筛选相关细胞和质粒。 

 
质量标准   
 3.1 文库库容量:大于1*10^7CFU。
 3.2 平均插入片段:大于1.2Kbp。
 3.3 阳性率:大于95%。  
 
服务时间 
 20个工作日内
 备注1:该酵母文库可以选择增加均一化处理步骤,我们使用DSN法均一化方法,可以构建出高质量的均一化酵母杂交文库,可以大大减少后续酵母筛选的工作量和筛选效率等。  

提供的产品
  ♦ 详细的实验报告  
  ♦ 酵母双杂交(酵母单杂交)文库质粒、菌液  
  备注2:如果客户需要转化酵母,我们可提供100管酵母甘油菌工作液及母液(同clontech)。  
 
服务周期
 获得合格的总RNA后25工作日,如需转化酵母延长15个工作日。 
  
材料要求 
  客户构建指定的酵母双杂交cDNA文库,由客户提供组织、细胞或总RNA给我们即可:
  细胞样本:细胞数量大于1*10^7 
 动物样本:大于1g 
  物样本:大于2g 
 总RNA:大于200ug 

 

 

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公司简介

天津迈基生物科技有限公司是一家致力于遗传疾病及妇幼生殖健康筛查产品开发和应用的精准医疗高新技术企业。由多位海归博士和医生联合创立。
公司依托广泛而深厚的国际技术合作,掌握了遗传疾病、辅助生殖和产前诊断领域国际先进技术,致力于打造全生态大健康服务平台,构筑国际领先的妇幼医疗品牌!
公司获天津市科委投资,是天津市着力打造的明星企业。公司在美国洛杉矶、澳大利亚、北京、武汉、成都、济南、西安等地均设有办事处,拥有近20家海外经销商,已逐步在国际市场崭露头角。通过与美国费城儿童医院、北京军区总医院、中科院等国际顶尖妇幼疾病诊疗、研发机构建立合作,建成重大疾病和遗传病筛查远程诊疗服务体系,目前已为国际数十家药企、大型医院、体检中心、保险公司、科研院所提供产品和技术服务。
公司为天津市“千企万人”计划重点支持企业,已获得国家知识产权局授权专利十余项,软件著作权近十项,近十项发明专利在申请或审核中,技术实力达到国际先进水平。


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