KASP法基因分型
KASP法基因分型 |
KASP法基因分型介绍 KASP(Kompetitive Allele-Specific PCR),即竞争性等位基因特异性PCR,原理上与TaqMan检测法类似,都是基于终端荧光信号的读取判断,每孔反应都是采用双色荧光检测一个SNP位点的两种基因型,不同的SNP对应着不同的荧光信号。 KASP技术与TaqMan法类似,它与TaqMan技术不同的是,它不需要每个SNP位点都合成特异的荧光引物,它基于独特的ARM PCR原理,所有的位点检测最终都可以使用通用荧光引物进行扩增,这降低了KASP技术的试剂成本,既有准确度,又降低了成本,更具SNP位点适用性,因此在医学、农学检测方面KASP技术都有很好的应用潜力,如癌症、代谢疾病、心血管疾病、糖尿病、动植物育种、水产养殖等研究。
技术原理
KASP反应包括Primer Mix和Master Mix两种主要成分。Primer Mix由两条末端碱基不同的等位基因正向引物与一条反向引物构成,两条正向引物5’端分别连有不同序列的检测引物序列。Master Mix包含两条带有不同荧光的检测引物。 1、变性模板与Primer Mix中相匹配的引物结合并退火,延伸后序列被加上了检测引物的序列。 2、等位基因特异性的末端序列的互补链合成。 3、带有不同荧光的两条检测引物与互补链结合,特异序列对应的检测引物随PCR反应指数性扩增,相应荧光信号被检测。
实验过程:
实验结果:
KASP技术优势 1、只需要合成两条通用荧光探针,节省了探针的合成费用。 2、支持低、中、高通量研究,以及单个重复实验。 3、对PCR仪和荧光定量仪等仪器设备具有良好的兼容性。
我们的优势 1、提供各种实验材料和仪器,满足项目课题实验需要。 2、专业的操作人员。 3、高规格实验室。 4、数据结果交付周期快。 5、完善的服务体系,全程跟进,确保满意。
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