植物样品石蜡切片技术服务
植物石蜡切片技术服务
我公司专业提供石蜡切片技术服务,擅长植物样品。实际操作处理过各种植物样品。常规植物的根、茎、叶、花、果实、花芽、叶芽、等都做过。对于一些有特殊要求的样品,也可以提供连续切技术服务,通过将样品连续切片的方式,找到需要观察到的生长点。实验质量可靠,周期可控。
1、 植物样品固定
固定就是用药品把材料细胞立即杀死,使细胞的原生质凝固,以保持原来组织及结构不发生变化,常见的固定液有FAA固定液和卡诺固定液。
2、软化
软化的目的是防止材料在脱水过程中过度变硬造成材料变碎难以切片。
3、 脱水
脱水的目的是除去材料中的水分,便于透明剂渗入组织,使材料变硬,形状稳定,在切片时不易变形,脱水操作应缓慢进行,不能操之过急或时间过长,以免组织变脆或收缩。
4、透明
透明的目的一方面为了除去材料中的脱水剂,使材料透明干净,增加折光率,利于观察,另一方面也便于石蜡和封固剂的渗入,为浸蜡作好准备。
5、 浸蜡
浸蜡的目的是以石蜡等包埋剂渗透植物组织,同时由于石蜡作支持物,使材料硬度适宜,便于切片。
6、包埋
材料依次经3次浸蜡后,石蜡已完全渗入材料中,即可进行包埋。
7、 修蜡、切片、展片
在包埋槽内的蜡块完全变硬之前,修成大小适中的蜡块。将蜡块固定在切片机上进行连续切片,厚度 7~10µm。挑选含有完整材料的蜡带,截取石蜡条带放置载玻片上。先使蜡带光面向下排放在载玻片上,然后再滴加少量蒸馏水将蜡带均匀分布粘着在载玻片上。之后,放置到 52℃的烘片机展平蜡带。
8、脱蜡
将粘着蜡片的载玻片浸入盛有纯脱蜡剂的液缸中 20 min,再依次转入 1/2 脱蜡剂+1/2 无水乙醇混合液、无水乙醇、95%、90%、85%、80%、70%、50%、30%乙醇中各 5min,完全脱除材料中的石蜡。
1.10 染色、脱水、透明、封片
在脱蜡的载玻片上涂刷苏木精染液,然后放置到通风处进行氧化约 40~60min,载波片上的样品逐渐变成蓝紫色。用清水冲洗 1min,再用蒸馏水轻轻地冲洗1 次,然后放入 30%、50%、70%、80%、85%、90%、95%、无水乙醇、1/2 脱蜡剂+1/2 无水乙醇混合液各 5min,用XX剂溶液进行脱水、透明 20 min,*后用加拿大中性树胶封片,制成永久切片。
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