CO-IP/WB/ChIP/免疫组化（荧光）
基本信息
服务详情
一、免疫共沉淀( Co-mmunoprecipitation, Co-IP )
1.1Co-IP :是一种利用抗原抗体相互作用的免疫学原理来研究蛋白质相互作用的经典实验方法,它可以确定两种蛋白在完整细胞内生理条件下是否存在相互作用。
1.2免疫共沉淀(CoIP )实验步骤
1.试剂准备,样品收集
2.免疫沉淀反应后,在进行电泳
3.通过免疫共沉淀确定结合蛋白
二、免疫印迹immunoblotting
2.1免疫印迹immunoblotting:蛋白质印迹western blot，它是根据抗原抗体的特异性结合检测复杂样品中的某种蛋白的方法。Western blot是在凝胶电泳和固相免疫测定技术基础上发展起来的一种新的免疫生化技术。由于western blot具有SDS-PAGE的高分辨力和固相免疫测定的高特异性和敏感性，现已成为蛋白分析的一种常规技术。Western blot常用于鉴定某种蛋白，并能对蛋白进行定性和半定量分析。
2.2蛋白质印迹western blot实验步骤
1.蛋白提取和定量（如果提供蛋白样品，则直接电泳预实验检测抗体特异性）；
2.SDS-PAGE 10-15% 变性聚丙*酰胺凝胶电泳；
3.转膜（PVDF膜）；
4.封闭 （5%脱脂奶粉）；
5.一抗孵育（其中内参基因为Tubulin或HistoneH3.1）；
6.二抗孵育（如果由于材料降解或一抗造成实验无法继续，则收相关预实验费用）；
7.显色（ECL）；
8.曝光、洗片、灰度分析；
三、ChIP(Chromatin immunoprecipitation)染色质免疫共沉淀
3.1染色质免疫共沉淀：技术主要应用于验证及探寻体内环境中，蛋白质和DNA的直接相互作用，旨在探索特定蛋白质在DNA上的特定结合序列，常在研究转录调控以及组蛋白修饰中被应用到。
3.2ChIP实验步骤
1.样品准备
2.细胞固定
3.超声打碎
4.免疫沉淀
5.洗涤
6.DNA纯化
四、免疫组化(荧光）
4.1兔疫荧光:又称为荧光抗体技术,将荧光标记技术和免疫学方法结合起来,利用抗原抗体相互作用从而对组织或细胞内的抗原或抗体 物质进行定位、示踪定性以及相对定量等。
4.2石蜡切片兔疫荧光实验步骤
1.烘箱内进行烘片,然后将切片进行常规脱蜡至水;
2.抗原修复:使用水浴锅或电炉煮沸热修复,或者中档微波修复,缓冲液为0 01M柠檬酸钠缓)冲液(pH6.0) ;
1.1Co-IP :是一种利用抗原抗体相互作用的免疫学原理来研究蛋白质相互作用的经典实验方法,它可以确定两种蛋白在完整细胞内生理条件下是否存在相互作用。
1.2免疫共沉淀(CoIP )实验步骤
1.试剂准备,样品收集
2.免疫沉淀反应后,在进行电泳
3.通过免疫共沉淀确定结合蛋白
二、免疫印迹immunoblotting
2.1免疫印迹immunoblotting:蛋白质印迹western blot，它是根据抗原抗体的特异性结合检测复杂样品中的某种蛋白的方法。Western blot是在凝胶电泳和固相免疫测定技术基础上发展起来的一种新的免疫生化技术。由于western blot具有SDS-PAGE的高分辨力和固相免疫测定的高特异性和敏感性，现已成为蛋白分析的一种常规技术。Western blot常用于鉴定某种蛋白，并能对蛋白进行定性和半定量分析。
2.2蛋白质印迹western blot实验步骤
1.蛋白提取和定量（如果提供蛋白样品，则直接电泳预实验检测抗体特异性）；
2.SDS-PAGE 10-15% 变性聚丙*酰胺凝胶电泳；
3.转膜（PVDF膜）；
4.封闭 （5%脱脂奶粉）；
5.一抗孵育（其中内参基因为Tubulin或HistoneH3.1）；
6.二抗孵育（如果由于材料降解或一抗造成实验无法继续，则收相关预实验费用）；
7.显色（ECL）；
8.曝光、洗片、灰度分析；
三、ChIP(Chromatin immunoprecipitation)染色质免疫共沉淀
3.1染色质免疫共沉淀：技术主要应用于验证及探寻体内环境中，蛋白质和DNA的直接相互作用，旨在探索特定蛋白质在DNA上的特定结合序列，常在研究转录调控以及组蛋白修饰中被应用到。
3.2ChIP实验步骤
1.样品准备
2.细胞固定
3.超声打碎
4.免疫沉淀
5.洗涤
6.DNA纯化
四、免疫组化(荧光）
4.1兔疫荧光:又称为荧光抗体技术,将荧光标记技术和免疫学方法结合起来,利用抗原抗体相互作用从而对组织或细胞内的抗原或抗体 物质进行定位、示踪定性以及相对定量等。
4.2石蜡切片兔疫荧光实验步骤
1.烘箱内进行烘片,然后将切片进行常规脱蜡至水;
2.抗原修复:使用水浴锅或电炉煮沸热修复,或者中档微波修复,缓冲液为0 01M柠檬酸钠缓)冲液(pH6.0) ;
公司简介
无锡菩禾生物医药技术有限公司（简称“菩禾”）成立于 2013年，是一家专业提供生命科学技术服务的高科技企业。拥有实验室、实验设备以及敬业的技术团队。多年的生物学技术服务积累建立了专业、严谨、高效率的技术服务平台。菩禾技术平台涵盖多方面的生物学技术体系如各种哺乳动物及人细胞分离培养技术、流式技术、细胞功能分析技术、组织工程构建技术、蛋白互作分析技术、基因重组构建技术、各种疾病模型构建技术及病理分析技术等。
菩禾以客户为中心，向全球医学研究院所、生物技术公司、制药公司及医疗器械公司提供体系化的生物技术方案询、生物技术支持及生物技术检测等服务。菩禾服务旨在通过“严谨、专业、高效率“的技术平台，帮助全球医学研究客户减少生物学实验方法建立及开发的时间/经费浪费；排除实验试剂、耗材、环境等影响项目研究结果的因素，从而加快推进合作单位项目研发进程。
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