免疫与抗体

免疫荧光

基本信息
服务名称:
免疫荧光
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总点击数:
167
更新日期:
2023-12-04
服务类别:

服务详情

概念

免疫荧光技术(Immunofluorescence technique )又称荧光抗体技术,是标记免疫技术中发展最早的一种。它是在免疫学、生物化学和显微镜技术的基础上建立起来的一项技术。很早以来就有一些学者试图将抗体分子与一些示踪物质结合,利用抗原抗体反应进行组织或细胞内抗原物质的定位。目前我们可以对石蜡切片、冰冻切片、细胞爬片、组织芯片进行免疫荧光检测。

原理

免疫学的基本反应是抗原-抗体反应。由于抗原抗体反应具有高度的特异性,所以当抗原抗体发生反应时,只要知道其中的一个因素,就可以查出另一个因素。免疫荧光技术就是将不影响抗原抗体活性的荧光色素标记在抗体(或抗原)上,与其相应的抗原(或抗体)结合后,在荧光显微镜下呈现一种特异性荧光反应。

实验流程

(1)石蜡切片脱蜡至水,或者制作的冰冻切片用冷丙酮在4℃固定10-20分钟;
(2)抗原修复,冰冻切片无需修复;
(3)用0.01M PBST漂洗3次,每次5 min;
(4)滴加正常的血清室温封闭30 min;
(5)加未标记的特异性抗体,4℃过夜;
(6)用0.01M PBST漂洗3次,每次5 min(震荡漂洗);
(7)加荧光标记的二抗抗体,37℃湿盒避光作用30 min;
(8) 0.01M PBST避光漂洗3次,每次5 min;
(9)甘油缓冲液封片;
(10)荧光显微镜观察。

实验结果 

注意事项

1. 荧光有衰减,寄回或者重拍都可能有荧光消失的现象,建议客户在下单时增加拍照张数。
2.做石蜡包埋样本保存及运输:常温置于4%多聚甲醛固定液内保存及运输(需注意固定液的量最好是组织的10倍以上,样本需完全浸泡于固定液内并防止样本贴壁固定不良,大标本最好使用大的标本瓶/袋运输,建议在大标本上按取材包埋要求做多条平行切口,以防标本中心固定不透彻。运输过程中防止固定液渗漏)。
3.做冰冻切片样本保存及运输:-80℃或液氮长期保存,干冰运输。

公司简介
武汉傲星生物科技有限公司是一家专注于为生命科学研究,医学研究,病理学研究,药物研究等提供基础科研技术服务和科研产品的生物技术服务公司。由武汉大学和华中科技大学医学博士团队创业组建。公司技术均为生命科学相关专业毕业,对科研具有独特的认知和情怀。可提供实验实施(病理学、分子生物学、免疫学、细胞生物学、动物模型、病毒包装等生物科研服务)、数据统计分析、论文翻译及润色修改,优秀硕博毕业生工作推荐等一体化全方位服务。擅长神经系统,糖尿病,皮肤病,内分泌等众多研究方向。旨在为广大科研工作者提供专业的科研解决方案和培训计划。

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