分子与细胞

sgRNA设计CRO服务

基本信息
服务名称:
sgRNA设计CRO服务
英文名称:
参考报价:
总点击数:
319
更新日期:
2022-07-11
服务类别:

服务详情
CRISPR-Cas9基因编辑技术在疾病基础研究、靶点验证、药物分子的高通量筛选、以及遗传性疾病的治疗等领域得到了越来越广泛的应用。sgRNA在CRISPR-Cas9基因编辑系统中具有准确识别靶基因序列的作用,其效果可影响编辑的效率、是否发生脱靶等,甚至对最终基因编辑的效果产生决定性作用。因此,设计合理有效的sgRNA是我们实现基因编辑的重要基础。

 

gRNA的设计

gRNA设计的在线工具很多,常用的如张锋实验的CRISPOR(http://crispor.tefor.net/),只需输入目标序列,种属基因组与相应的PAM,则可以得出多个gRNA,以及每个gRNA对应的特异性、切割效率和潜在脱靶位点,一般选择特异性、切割效率得分高的gRNA。

但是很多实验需要根据经验设计sgRNA。如果需要手动设计gRNA,则需要考虑其特异性与切割效率。在靶点设计时要综合考虑所有候选靶点的序列、位置、正负链、GC含量、潜在的脱靶位点等信息。

sgRNA设计的一般流程

1. 分析靶基因信息

2. 选择靶标区域设计sgRNA

3. 脱靶分析

 

艾迪优势:

1. 10年基因编辑研发经验,3年CRO服务

2. 自主知识产权sgRNA设计逻辑,数千例成功基因编辑sgRNA案例

3. 基因编辑治疗的实践经验

 

 

附:sgRNA设计,你需要注意那些问题?

靶基因信息的分析。在NCBI、Ensembl等查询过程中要注意物种的选择和确定靶基因在数据库中的登录号,避免查找错误,再进一步关注其所在基因座上下游基因情况、转录本数量、外显子数量及长度、翻译起始位点与终止位点等信息。

靶区域的选择原则

对于基因敲除可采用移码突变和片段敲除,一般采用移码突变,2种不同策略需遵循以下原则:不影响其他基因,尤其是编码蛋白的基因;所敲除的外显子编码序列之和为非3的倍数;尽可能影响所有的转录本;不会残留蛋白的功能结构域。

公司简介
广州艾迪基因科技有限责任公司由多名留学归国博士和生物科技领域精英联合创建,坐落于广州高新技术产业示范基地——科学城。公司专注于发展和优化基于CRISPR/Cas的基因组编辑技术,依托最先进的单克隆打印平台,为用户提供高质量的技术服务和基因编辑产品。  我们坚守“以客户为中心、以奋斗者为本”的原则,秉承“创新、共享”的发展理念,以达到客户对“产品质量的满意,先进技术的满意,售后服务的满意 ”为目标,确保每一位用户都能获得更卓越的体验。 艾迪原则:以客户为中心  以奋斗者为本 艾迪理念:创新 共享 艾迪目标:给生命多一次机会

售后服务
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