分子与细胞

基因敲除载体构建

基本信息
服务名称:
基因敲除载体构建
英文名称:
参考报价:
1800
总点击数:
8
更新日期:
2025-08-05
服务类别:

服务详情
基因敲除载体构建
艾迪基因基于自身研发的EditX™基因编辑平台,采用优化升级的CRISPR/Cas9系统,可综合研究目的、基因与细胞等情况,制定合适的敲除策略,构建符合需求的敲除载体。
 详情描述
目前常用CRISPR-Cas9系统来实现基因敲除,CRISPR-Cas9系统具由sgRNA和Cas9两部分组成。Cas9蛋白是一种由gRNA引导的DNA切割酶,具有特异切割双链DNA的活性。在gRNA的引导下,Cas9蛋白能够识别并结合到目标DNA序列上。一旦Cas9蛋白与目标DNA序列结合,其切割活性就被启动,导致DNA双链断裂(DSB),成为细胞修复机制的一个信号。细胞对于DNA双链断裂有两种主要的修复方式:非同源末端连接(NHEJ)和同源重组(HDR)。
*非同源末端连接(NHEJ):在没有模板DNA的情况下,细胞通过NHEJ修复机制将断裂的DNA两端连接起来。但这一过程容易引入小的插入或缺失(Indels),导致基因失活。这种修复方式常被用于基因敲除。 
*同源重组(HDR):当提供一段模板DNA时,细胞可以通过HDR修复机制在修复过程中精确插入新的DNA序列。这种修复方式被用于引入特定的突变或基因片段。


 现货产品
 
 
  FAQ
1、如何选择合适的载体类型?
选择载体时,应考虑实验的目的和宿主细胞的类型。例如,质粒载体常用于细菌中基因的表达或扩增,病毒载体则更适合用于哺乳动物细胞中的基因转导。除此之外,载体的启动子、复制子以及抗生素选择标记也需要根据具体需求进行选择。
 
2、艾迪基因载体构建的宿主菌是什么?顾客可以使用什么类型菌株来扩增质粒载体?
载体在进行扩增时,通常会使用大肠杆菌(E. coli)菌株来进行。在实验操作中,常用的大肠杆菌菌株是DH5α。DH5α适用于大多数非重组型载体。对于重组型载体,如慢病毒载体和转座子载体等,可以使用Stbl3菌株进行扩增。Stbl3是一种特殊的大肠杆菌(E. coli)菌株,来源于,HB101 E. coli strain,其基因组含有重组酶recA13突变,这可以有效地抑制长片段末端重复区的重组,从而降低错误重组的概率。

该产品被引用文献
 参考文献
1. MIA PaCa-2和PANC-1细胞中敲除FUT8基因
α1,6-Fucosyltransferase contributes to cell migration and proliferation as well as to cancer stemness features in pancreatic carcinoma
胰腺导管腺癌(Pancreatic ductal adencarcinoma, PDAC)是一种极其恶性的肿瘤,占所有胰腺癌的90%。研究表明,癌细胞表面的异常糖基化变化与肿瘤进展和转移正相关,α1,6-岩藻糖基转移酶(FUT8)是负责催化核心岩藻糖基化的关键酶,其在多种恶性肿瘤中的表达和激活异常,与多种生理和病理过程相关,尽管FUT8在其他类型的癌症中的作用已被观察到,但其在PDAC恶性转化中的具体分子机制和作为潜在治疗靶点的可能性尚不清楚。
研究人员使用CRISPR/Cas9系统在MIA PaCa-2和PANC-1细胞中敲除FUT8基因,通过Transwell迁移实验和创伤愈合实验评估FUT8-KO细胞的迁移能力,通过MTT实验和集落形成实验评估FUT8-KO细胞的增殖能力,并检测了FUT8-KO细胞中癌症干细胞标志物的表达水平。结果显示,与野生型细胞相比,FUT8-KO细胞的迁移能力、增殖和集落形成能力显著降低,FUT8-KO细胞中癌症干细胞标志物的表达降低。FUT8基因敲除细胞揭示了FUT8在胰腺癌中的重要作用,证明了FUT8可能是胰腺癌治疗的一个潜在靶点,为未来的胰腺癌治疗策略提供了新的视角。
公司简介
广州艾迪基因科技有限责任公司由多名留学归国博士和生物科技领域精英联合创建,坐落于广州高新技术产业示范基地——科学城。公司专注于发展和优化基于CRISPR/Cas的基因组编辑技术,依托最先进的单克隆打印平台,为用户提供高质量的技术服务和基因编辑产品。  我们坚守“以客户为中心、以奋斗者为本”的原则,秉承“创新、共享”的发展理念,以达到客户对“产品质量的满意,先进技术的满意,售后服务的满意 ”为目标,确保每一位用户都能获得更卓越的体验。 艾迪原则:以客户为中心  以奋斗者为本 艾迪理念:创新 共享 艾迪目标:给生命多一次机会

售后服务
联系方式
单位名称:
详细地址:
广州市黄埔区科学城掬泉路3号广州国际企业孵化器D区D501-D502号房
qq:
官网:
联系电话:

020-32238856

Email:

在线询价
*姓名:
*单位:
职位:
*手机:
*邮箱:
地址:
*地区:
资料:
需要
不需要
报价:
需要
不需要
留言:
验证码:
我希望获得多家供应商报价
首页 我的账户 立即询价 电话咨询