▍crRNA设计与合成

crRNA由两部分结构组成，一部分是与Cas效应器结合的发夹结构，另一部分是与靶标基因片段特异性识别的“原间隔”基序(一般为20个碱基)。crRNA通过与Cas蛋白及靶标基因片段结合形成Cas-crRNA-靶标三元复合物，然后靶标序列被Cas蛋白切割。根据不同的检测体系和Cas蛋白的类型，可以设计不同的crRNA来满足检测需求。其中，Cas12a由crRNA引导，特异性识别并剪切带PAM（5´TTTN-3´）的dsDNA靶标，Cas13a在crRNA的引导下对ssRNA靶标进行识别和剪切，不需要特定的PAM来进行靶标识别。

艾迪基因积累多年的CRISPR检测经验，开发了特有的crRNA设计系统，大大提高crRNA的特异性和切割活性，使CRISPR检测的灵敏度和准确度更上一个台阶，可为广大IVD企业和科研客户提供crRNA的设计和合成服务。

▍服务详情 

▍服务类型

crRNA由两部分结构组成，一部分是与Cas效应器结合的

▍服务优势

▍实验流程

▍数据案例

经艾迪基因设计系统得到的crRNA，与其他设计算法得到的crRNA进行体外切割活性测试。

检测体系中添加待检Target模版、Cas12a、crRNA和荧光探针，当crRNA与Cas12a组装成功能复合物并识别Target模版后，会激活Cas12a的反式切割活性切割荧光探针释放出荧光信号。可以通过荧光值来反映crRNA的切割活性与灵敏度。左图和右图是分别针对A1 Target和A2 Target进行测试。结果显示，艾迪基因生产的crRNA的荧光强度更强，切割活性与灵敏性明显更优。

▍crRNA产品

DOI:10.1038/s41586-024-07054-3

DOI:10.1002/adma.202311964

DOI:10.1016/j.biomaterials.2022.121990
DOI:10.1016/j.jhazmat.2021.126305

DOI:10.1016/j.bios.2024.116676