新型RNA原位测序服务
原位测序技术(In Situ Sequencing,ISS)依赖于锁式探针和滚环扩增技术,它是以缺口靶向(Gap-targeted Sequencing)或条形码靶向(Barcode-targeted Sequencing)为测序策略,同时引入边连接边测序的化学原理(Sequencing-by-ligation Chemistry),以滚环扩增产物为测序媒介进而在组织或细胞原位对RNA实现短片段测序的技术。通过4轮连续测序成像一次性最多可以检测出256种靶标mRNA分子。
技术流程
(1)定制探针:针对用户提供的基因的非保守区设计探针并合成
(2)样本前处理:将冰冻切片退冻、固定、脱水和透化,以便探针和反应所需的酶等成分进入组织细胞内部
(3)探针杂交与滚环扩增:探针与RNA杂交,之后连接成环;通过滚环扩增反应放大编码信号
(4)原位成像:利用边合成边测序的化学原理,通过采集荧光信号得到对应位置的编码碱基;经过序列解码,可识别出该位置靶向结合的基因
(5)图像分析:获得每个靶基因在组织中的空间表达位置,用不同符号(或颜色)标记在同一张组织图像中;通过细胞边界识别等方法得到单细胞水平的基因表达定量数据,可进行高级分析
产品优势
创新技术:无需反转录成cDNA,探针特异性结合mRNA,大大提高基因检出效率
高灵敏度:每个基因设计3~5对双连接探针,低丰度表达基因依旧高效检出
广泛适应:适用于冷冻OCT包埋及石蜡包埋组织样本或者切片,细胞爬片样本等
个性定制:用户自定义基因panel设计,支持最多256个基因
高分辨率:最高120nm分辨率,亚细胞水平定位RNA
应用多样:器官发育、神经科学、肿瘤免疫、病原感染、药物开发等领域
单位名称: |
详细地址:
吴江经济技术开发区联杨路南侧、龙桥路西侧(联杨路139号)
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