测序/合成

稳定细胞系构建

基本信息
服务名称:
稳定细胞系构建
英文名称:
Stable Cell Line Construction Services
参考报价:
欢迎来电详询15298397025
总点击数:
222
更新日期:
2023-06-08
服务类别:

服务详情

艾柏森生物提供重组人源化抗体稳定过表达细胞株构建服务。流程如下——

1. 载体构建&病毒包装

将人源化的抗体基因转接到慢病毒载体上,然后对质粒表达进行检测,通过包装获得过表达目的基因的慢病毒质粒。慢病毒载体系统的包装成分与载体成分一起转染293细胞进行包装;24至48小时后,收集富含慢病毒颗粒的细胞上清液,浓缩后进行滴度测试。

 

稳定细胞系构建; Stable Cell Line Construction Services

 

2. 细胞转染

常用的真核表达载体的抗性标志物有嘌呤霉素(Puromycin)、潮霉素(Hygromycin)和新霉素(Neomycin)。首先确定Puromycin/G418的筛选浓度和病毒转染浓度,然后病毒悬液转染细胞24h,Puromycin/G418筛选稳转株,ELISA和WB法鉴定。

3. 单克隆化

使用Molecular ClonePix2系统,高通量、自动化的筛选出100-200个高水平分泌克隆,并从中挑选最佳10个高产克隆,进行下一步的稳定性测试。

 

稳定细胞系构建; Stable Cell Line Construction Services

 

4. 细胞系稳定筛选

细胞株多次传代数次后,就有可能会出现遗传不稳定性。我们挑选出最优的10个克隆,进行10次传代后,qPCR和WB法检测细胞株的稳定性。最后我们提供序列及载体报告, 3株表达最好的细胞株,表达分析、稳定性测试报告以及详细的稳定细胞株构建报告。

 
 
 
 
公司简介
艾柏森生物科技有限公司致力于基因、重组蛋白、抗体、噬菌体文库等生物制剂的研发,并致力于为客户提供一站式的CRO技术服务。 公司成立至今,以自主研发为核心,围绕大量专业技术人才,先后搭建了蛋白表达纯化平台、抗体定制平台、抗体工程平台、抗体药物平台、质量分析平台以及模式动物基因工程研究平台。以抗体药物研发一条链解决方案为基础,我们主要为客户提供重组蛋白表达生产、抗体制备、噬菌体库构建与筛选,单克隆抗体药物开发(抗体筛选、抗体测序、抗体分析、抗体人源化与亲和力成熟、表位作图、抗体工程改造与抗体药效学)、稳定细胞株构建与cGMP生产、细胞免疫(CAR-T/CAR-NK)、蛋白晶体学、蛋白质组学、生物信息学、药理毒理学等技术服务。

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