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酵母双杂交一对一互作验证

基本信息
服务名称:
酵母双杂交一对一互作验证
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总点击数:
144
更新日期:
2023-09-28
服务类别:

服务详情
原理简介

  酵母转录因子GAL4包括两个结构域,分别为DNA结合结构域(DNA-binding domain,BD)和转录激活结构域(Activating domain,AD)。BD能够识别位于GAL4-responsive gene的上游激活序列(Upstream activating sequence,UAS)并与之结合,AD可以启动UAS下游的基因进行转录。当BD或AD单独作用时不能激活转录,只有AD和BD在空间上充分接近时,GAL4转录因子才具有活性并激活下游基因的转录。
  该技术利用酵母转录因子GAL4的特性,将AD与X蛋白融合,BD与Y蛋白融合,如果X、Y互作形成蛋白复合物,那么AD与BD会在空间上充分接近,使GAL4转录因子激活并启动报告基因的转录。

实验流程

  ①AD与BD载体构建:目的基因克隆或目的基因合成;限制性内切酶酶切骨架载体并纯化;目的基因插入骨架载体;转化大肠杆菌,筛选阳性克隆并测序鉴定;
  ②共转酵母细胞:将目的AD载体与BD载体共同转化到酵母细胞中;
  ③二缺培养基培养转化的产物:将共转的酵母细胞均匀涂布在二缺板(SD/-Leu/-Trp)上培养;
  ④影印三缺和四缺板:将二缺平板上生长的酵母单克隆影印至三缺板(SD/-His/-Leu/-Trp)和四缺板(SD/-Ade/-His/-Leu/-Trp)上培养;
  ⑤拍照记录实验结果。

  技术服务范畴:验证两个已知蛋白质间的相互作用
  技术服务优势:
  ①团队经验丰富;
  ②交付周期短,提供原始图片,保证数据真实可靠。

公司简介
安徽中科圣安生物技术有限公司总部位于安徽省合肥市,核心团队成员由分子生物学、免疫学、细胞学等领域的博士硕士组成,由在国内科研领域有着多年从业经验的专业技术团队和企业管理团队组建而成,中科圣安生物一直秉承着“以人为本、诚信与品质”的发展理念。   中科圣安生物立足于生命科学,为基础生命科学研究领域的科学工作者提供生物学先进技术服务,公司以TurboID邻近标记(Proximity labeling, PL)技术为核心基础,致力于为科研工作者定制目标蛋白质互作网络数据库,为系统地解析蛋白质的功能,揭示生命体的奥秘提供了有力且可靠的技术支持。   同时,公司依靠自身的优势,还为科学工作者提供分子生物学技术服务,主要业务包括:酵母双杂交一对一互作验证;GST下拉实验(GST-pull down assay);免疫共沉淀(co-Immunoprecipitation,co-IP);双 分 子 荧 光 互 补 实 验 ( Bimolecular fluorescence complementation, BiFC);荧光素酶互补成像技术(Luciferase complementary imaging,LCI);凝胶阻滞实验(Electrophoretic Mobility Shift Assay,EMSA);亚细胞定位(观察蛋白的定位情况);TurboID邻近标记技术构建蛋白互作网络数据库等等。

售后服务
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