凝胶阻滞实验 EMSA
凝胶阻滞(Electrophoretic mobility shift assay, EMSA)实验是体外分析DNA与蛋白质相互作用的一种特殊的凝胶电泳技术。其原理为蛋白质与核酸分子结合后将大大增加其相对分子质量,而凝胶电泳中核酸的迁移率与其相对分子质量成正比,因此没有结合蛋白质的核酸片段跑得快,而与蛋白质结合形成复合物的核酸则跑得慢。
实验流程
凝胶阻滞(Electrophoretic mobility shift assay, EMSA)实验是体外分析DNA与蛋白质相互作用的一种特殊的凝胶电泳技术。其原理为蛋白质与核酸分子结合后将大大增加其相对分子质量,而凝胶电泳中核酸的迁移率与其相对分子质量成正比,因此没有结合蛋白质的核酸片段跑得快,而与蛋白质结合形成复合物的核酸则跑得慢。
①构建表达载体:目的基因克隆或目的基因合成;限制性内切酶酶切骨架载体并纯化;目的基因插入骨架载体;转化大肠杆菌,筛选阳性克隆并测序鉴定;
②转化表达菌株:将目的表达载体转化表达菌株;
③制备目的蛋白:诱导目的蛋白表达并提取纯化目的蛋白;
④进行凝胶阻滞(EMSA)实验;
⑤拍照记录实验结果。
1、转录因子与启动子区域的结合验证
2、蛋白-核酸复合体的形成
技术服务优势:
①团队经验丰富;
②提供原始图片,保证数据真实可靠。
单位名称: |
详细地址:
合肥市
|
qq:
|
官网: |
联系电话: |
Email: |