细胞模型
HCV亚基因组复制子模型
² HCV-RNA在此模型中复制效率很高,可以在分子水平进一步研究HCV在细胞系中的复制。并且,病毒复制所需要的酶系,如NS2-3和NS3/4A的蛋白水解酶,NS3的NTPase,RNA解旋酶及NS5B(RdRp),在这个系统中均能被HCV复制子编码。以上都可以作为抗HCV病毒药物筛选的靶点,是研发及改良抗丙肝药物的良好细胞模型。
² 检测指标:细胞内HCV RNA(荧光定量PCR法)等
HCV NS3/4A-SEAP
² HCV NS3/4A蛋白酶具有丝蛋白酶的活性,是HCV非结构蛋白成熟和病毒复制的关键。因此,NS3/4A是抗丙肝药物开发的理想靶点。在HCV NS3/4A-SEAP模型中,SEAP(secreted alkaline phosphatase)基因存在于NS3/4A蛋白酶切割位点NS4A/4B的下游。当NS3/4A蛋白酶活性较高时,分泌到细胞外的SEAP活性就相应的高。而且,SEAP的活性可以用化学发光法进行定量分析,因此这个系统可以用来高速、有效的筛选HCV蛋白酶抑制剂。
² 检测指标:碱性磷酸酯酶活性(化学发光法)等
HepG2.2.15乙肝细胞模型
² 乙型肝炎病毒(HBV)是比较严格的嗜肝DNA病毒,其感染的宿主范围狭窄。目前,抗HBV新药开发有众多良好的体外研究工具。在这些培养系统中,以HepG2.2.15在新药体外研究中应用最广、最多。该细胞株是用2个头尾相连的HBV DNA全基因的重组质粒转染受体细胞HepG2而成,可在体外无性繁殖,能够长期稳定的向培养上清中分泌HBsAg, HBeAg和完整的Dane颗粒,而且还能产生大量的复制中间体,是体外筛选抗HBV药物的良好细胞模型。
² 检测指标:细胞毒性实验(MTT法);上清HBsAg、HBeAg (酶联免疫试剂盒);上清HBV DNA (荧光定量PCR法)等
动物模型
鸭乙肝病毒模型
² 鸭乙肝病毒与人乙肝病毒同属嗜肝病毒,两者的病毒大分子结构和复制过程有很多相似之处;鸭乙肝病毒天然感染的鸭子已经作为乙型肝炎动物模型,目恰被广泛采用。
² 检测指标:病毒DNA含量(荧光定量PCR)、肝脏病理照片、肝脏电镜照片等
乙肝转基因小鼠
² 将乙肝病毒基因转移到小鼠基因组中,造成人为感染并能代代相传形成品系;这类转基因小鼠解决了乙肝研究缺乏动物模型的难题,是乙肝新药开发、药物筛选及乙肝治疗研究的理想动物模型。
急性肝损伤模型
² 用四氯化碳或氨基半乳糖造模,用于筛选改善肝细胞损伤的药物,并对其活性进行评价
肝纤维化模型
² 用四氯化碳、异种血清诱发肝纤维化,用于深入研究肝纤维化的病因和发病机制,筛选防治肝纤维化的有效药物。