进口Elisa试剂盒操作步骤：

​1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

2.  加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50µl，待测样品孔中先加样品稀释液 40µl，然后再加待测样品 10µl（样品*终稀释度为5倍）。加样进口Elisa试剂盒将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

3.  温育：用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。

100mg 盐酸米安色林 含量测定 常温，避光 4.  配液：将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用

5.  洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置 30 秒后弃去，如此

重复 5 次，拍干。

6.  加酶：每孔加入酶标试剂 50µl，空白孔除外。

7.  温育：操作同 3。

8.  洗涤：操作同 5。

9.  显色：每孔先加入显色剂 A50µl，再加入进口Elisa试剂盒显色剂 B50µl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色

15 分钟.

10. 终止：每孔加终止液 50µl，终止反应（此时蓝色立转黄色） 。

11. 测定：以空白空调零，450nm 波长依序测量各孔的吸光度（OD 值） 。 测定应在加终止液后 15 分钟以内

进口Elisa试剂盒原理：

本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中进口Elisa试剂盒水平。用纯化的抗体包被微孔板，制

成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次进口Elisa试剂盒，再与 HRP 标记的抗体结合，形成抗体-

抗原-抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB 在 HRP酶的催化下转化成蓝色，并在

酸的作用下转化成*终的黄色。颜色的深浅和样品中的进口Elisa试剂盒呈正相关。用酶标仪

在 450nm 波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中进口Elisa试剂盒浓度。