其他原代细胞试验步骤：

1、贴壁细胞用胰酶消化，离心收集。

2、细胞重悬于冰冷的PBS漂洗一次，离心收集。试验步骤2再重新作一边。

3、加入5mlDNA提取缓冲液，（10mmol/LTris-cl,0.1mol/LEDTA,o.5%SDS）,混匀。

4、加入25ul蛋白酶K,使终浓度达到100ug/ml,混匀，50℃水浴3h,

5、用等体积的酚抽提一次，2500rpm离心收集水相，用等体积的（酚，氯仿，异戊醇）混合物抽提一次，2500r/min离心收集水相

6、用等体积的氯仿，异戊醇抽提一次。加入等体积的5mol/L的LiCL,混匀，冰浴，10min.。

7、2500rpm离心10min.转上清于一离心管中。加入等体积的异丙醇。室温10min。2500rpm,离心10min。弃上清。

8、加入0.1倍体积3mol/L乙酸钠（PH5.2）与2倍体积-20℃预冷无水乙醇。-20℃20min。

9、12000r/min,室温离心5min。弃上清。将DNA溶于适量TE中。

其他原代细胞注意事项

1． 本产品为 50 次操作

2． 操作时，须带手套

3． 石蜡包埋前，组织切片固定，避免使用甲醛类固定剂

4． 所有操作在室温下进行

5． 试剂可以重复使用

6． 试剂具有腐蚀性，注意操作安全

7． 染色液（Reagent G）出现沉淀，可以温热、搅拌或过滤后使用

8． 染色液（Reagent G）须密封避光，如果变成红色，则影响染色效果

9． 试剂溶液在样品表面时，避免有气泡存在，同时确保铺满样品表面

10．样品染色避免过度，肉眼可见深红色即可终止染色

11．可以使用通用型苏木素复染试剂盒（GMS80067.1），增强染色对比度

12．染色完成后，即刻进行光学显微镜观察

13．本公司提供系列组织生物化学成分分析试剂产品