隐蔽站台实验（空间位置学习阶段）/Spatial acquisition

1、动物放入Morris水迷宫（Morris water maze，MWM）时面对迷宫壁。

2、每次试验的时间限制标准为1 min或2 min；通常，大鼠2 min，小鼠1 min。

3、在试验间隔（ITI）将动物放在平台上。以前使用过30 s或60 s的ITI，但现在普遍使用15 s，并能产生良好的学习能力。然而，较长时间的ITI通常应用于小鼠，特别是在第一次测试阶段，这可以提高学习能力。

4、动物通常每天都要进行多次试验。最常见的是每只动物每天进行4次试验。这是因为有四个主要的起始位置，这能每天保持起始位置的平衡。几乎没有证据表明，每日试验次数对实验结果存在着巨大的敏感性差异，但有证据表明，每天进行较少的试验可以提高学习能力。

5、可以让一只动物连续测试完四次，每次之间保留有试验间隔，再换下一只测试。另一种方法是一只动物测试完试验1让动物在平台上停留15 s，然后把它移到笼子里，再让第二只动物测试试验1，重复这个序列，直到所有动物完成试验1，然后再测试试验2，3和4。后一种方法提高了小鼠的学习能力，但大鼠没有可供支持的数据。

6、每天重复这些试验，重复测试的天数取决于动物的学习表现。每天4次试验，约5-6天（20-24次试验）通常足够大鼠（在210厘米迷宫中）或小鼠（在122厘米迷宫中）达到稳定表现。然而，如果任务变得更加困难，那么可能需要更多的测试时间来使动物达到稳定表现。相比之下，大鼠在122厘米迷宫中可能在第2天或第3天即可接近稳定表现。

空间探索实验/ Reference memory: probe trial

1、将动物放在迷宫中一个新的起始位置，面对水池壁——例如，原来平台位置的对面（180°）。这是因为使用新的起始位置，可以确保其空间偏好反映了目标位置的记忆，而不是针对特定的游泳路径。

2、空间探索试验的目的是确定动物是否记得平台所在的位置。表征这种记忆的指标包括原平台象限滞留时间，原平台穿越次数，到原目标位置的平均距离，与原目标位置的角度（方位），第一次穿越原目标位置的潜伏期等等。

3、空间探索试验应在隐蔽站台实验结束后至少24h再测试。

空间反转实验/Spatial reversal

1、如果需要进行空间反转测试，应将平台重新定位到另一个象限（通常是相反的象限），并每天进行一组4次试验，连续5天（同隐蔽站台实验）。

2、 反转阶段结束时，进行反转空间探索试验（同空间探索实验）。

评价指标的考虑 

1、在MWM中，任务学习阶段的表现主要由潜伏期（从试验开始到找到平台的时间）测量。路径长度也是广泛使用的指标，并且有不受游泳速度影响的优点。另一个有用的指标是与平台的累积距离。大多数视频跟踪程序都会生成这种度量，即每秒钟或每几毫秒测量一次距平台的距离。累积距离被认为是衡量空间学习能力的一个更好的指标。第一角度即在试验开始时测量动物相对于从入水点到平台的直线的游泳角度。角度测量似乎对许多类型的实验处理都很敏感。根据大量研究发现，潜伏期、路径长度和累积距离高度相关，而第一角度与前三项指标的相关性较低。其实这是合乎逻辑的，因为前三个指标都反映了整个试验期间的表现，而第一角度是试验期间某一特定点（试验开始时）动物表现的快照。

表三：Morris水迷宫中学习表现的四个计算机跟踪指标的相关系数矩阵

2、在空间探索实验中，作为记忆指标的平台穿越次数有一个局限性，即它的变异性较大，而且发生频率很低，特别是当目标平台较小或水池直径较大时。此外，根据跟踪软件，可能会出现交叉欠计数（漏掉一些计数）。研究发现到目标位置的平均距离、目标象限中的停留时间或路程以及第一角度比精确的平台穿越提供了更稳健的记忆度量。

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