细胞培养技术是目前体外实验中最常用的方法。单层的细胞培养因不能完全模拟多细胞相互作用的体内环境、细胞趋向单一化,而无法探讨多细胞间的关系。因此,为了满足科研需要,细胞共培养技术应运而生。细胞共培养又称为复合培养或混合培养,是指将2种或2种以上细胞放在同一培养系统中进行培养。
与单层细胞培养相比,细胞共培养模型更接近人体内环境,更有利于研究细胞与细胞、细胞与培养环境间的相互作用,通过检测不同细胞因子之间的关系,探讨药物的作用机制和可能的作用靶点。目前,共培养技术已经被广泛应用于体外生理及病理模型、组织工程、细胞分化研究、药物研发、药物分析以及药物作用机制和部位的研究。
细胞共培养方法分为三种:
①直接接触共培养 ②间接接触共培养 A、条件培养基共培养法 B、“爬片式”共培养法 C、嵌入式细胞共培养法 ③三维细胞共培养法
为了研究NK细胞与肿瘤细胞在直接接触共培养后对肿瘤细胞的杀伤作用,我们使用Celloger
® Mini Plus对样本进行延时记录。Celloger
® Mini Plus是一款全自动活细胞成像系统,配备了最先进的荧光/明场显微镜、自动聚焦和实时多位点成像技术。Mini Plus提供可以获得最佳图像和准确结果的所有工具,各种基于细胞的研究工作和应用都可以用这个全方位的系统来完成。该成像设备使用全自动镜头可以分别在X/Y轴移动117mm x 77mm,可以根据实验人员的设置(时间间隔、周期、总时长)在移动范围里获取多个位点的图像。
应用实例:Celloger® Mini Plus用于共培养研究
将Calcein-AM标记的K562细胞与NK92细胞共培养,研究K562与NK92细胞之间的相互作用,使用Celloger
® Mini Plus在4x物镜、明场与绿色荧光通道下记录两者细胞间的相互作用,每隔30分钟记录一次图像,共记录18小时。下图为明场与荧光代表性的Merge图像。
图. K562与NK92细胞共培养的明场与荧光Merge图像
结论
Celloger
® Mini Plus仪器体积小巧,可以放置在普通细胞培养箱中,并且可以承受自生热量,从而实现长期成像。通过优化荧光滤光片和光路,可以用最小的光强实时获得清晰的活细胞明场图像以及荧光图像。此外,Celloger
® Mini Plus兼容多种类型的培养容器,位置重现性高,多点成像时扫描性能稳定。因此,Celloger
® Mini Plus将为您的研究带来可靠的结果。