PCR引物和测序引物不同方面归纳
2024-10-17 来源:本站 点击次数:301
一、定义不同：
PCR是体外酶促合成特异DNA片段的一种方法，由高温变性、低温退火（复性）及适温延伸等反应组成一个周期，循环进行，使目的DNA得以迅速扩增, 具有特异性强、灵敏度高、操作简便、省时等特点。PCR引物是一段非常短的寡核苷酸序列，它能和靶DNA也就是模板DNA 3'端和5'端特异性结合。在PCR时，在每一次热变性之后，引物会和模板DNA特异性的结合在一起，然后DNA聚合酶就会从引物结合位置的3'末端开始进行DNA链的延伸。一句话总结，引物有点像一个向导，为DNA聚合酶提供结合位点的指引标识。
测序引物分自带引物和通用引物，自带引物为客户自行设计的PCR扩增引物或者载体及目的片段上设计的引物进行测序。
二、作用不同：
通用引物一般在购买载体时公司提供，一般测序引物如T7、SP6、M13等测序公司免费使用。
不仅可用于基因分离、克隆和核酸序列分析等基础研究,还可用于疾病的诊断或任何有DNA，RNA的地方。PCR又称无细胞分子克隆或特异性DNA序列体外引物定向酶促扩增技术。
三、适用不同：
PCR引物又称为寡核苷酸引物，也就是RNA，是由人工合成的，分为两种，引物1和引物2。由于DNA聚合酶只能从核苷酸链的5'端到3'端进行复制，也就是只能识别3'的尾端。
测序必须为特异性引物，不能为随机、兼并、不纯、带荧光标记、长度过长引物.测序引物长度一般要求在18-25BP，最长不超过30BP..PCR引物要求相对低一些.简单说来就是PCR引物可以用来扩增但是不一定适合测序。
PCR是体外酶促合成特异DNA片段的一种方法，由高温变性、低温退火（复性）及适温延伸等反应组成一个周期，循环进行，使目的DNA得以迅速扩增, 具有特异性强、灵敏度高、操作简便、省时等特点。PCR引物是一段非常短的寡核苷酸序列，它能和靶DNA也就是模板DNA 3'端和5'端特异性结合。在PCR时，在每一次热变性之后，引物会和模板DNA特异性的结合在一起，然后DNA聚合酶就会从引物结合位置的3'末端开始进行DNA链的延伸。一句话总结，引物有点像一个向导，为DNA聚合酶提供结合位点的指引标识。
测序引物分自带引物和通用引物，自带引物为客户自行设计的PCR扩增引物或者载体及目的片段上设计的引物进行测序。
二、作用不同：
通用引物一般在购买载体时公司提供，一般测序引物如T7、SP6、M13等测序公司免费使用。
不仅可用于基因分离、克隆和核酸序列分析等基础研究,还可用于疾病的诊断或任何有DNA，RNA的地方。PCR又称无细胞分子克隆或特异性DNA序列体外引物定向酶促扩增技术。
三、适用不同：
PCR引物又称为寡核苷酸引物，也就是RNA，是由人工合成的，分为两种，引物1和引物2。由于DNA聚合酶只能从核苷酸链的5'端到3'端进行复制，也就是只能识别3'的尾端。
测序必须为特异性引物，不能为随机、兼并、不纯、带荧光标记、长度过长引物.测序引物长度一般要求在18-25BP，最长不超过30BP..PCR引物要求相对低一些.简单说来就是PCR引物可以用来扩增但是不一定适合测序。
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