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InnoScan生物芯片在 PTEN 缺失黑色素瘤联合靶向治疗机制研究中的应用

2026-10-21     来源:微信公众号     点击次数:28

【Cancer Research】Targeting the PREX2/RAC1/PI3Kβ Signaling Axis Confers
Sensitivity to Clinically Relevant Therapeutic Approaches in Melanoma
靶向抑制 PREX2/RAC1/PI3Kβ 信号通路,提升黑色素瘤对临床药物治疗的敏感性

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研 究 背 景

黑色素瘤患者约半数携带 BRAF V600E(BRAF 蛋白第 600 位缬氨酸突变为谷氨酸)突变。目前主要采用靶向 BRAF/MEK 通路的药物,初期有一定疗效,但晚期转移患者极易出现耐药、肿瘤复发、远处转移等现象,整体预后较差。因此,急需开发耐药治疗的新方案。

基因组测序发现,黑色素瘤中 RAC1 基因的激活突变较常见,且可导致 BRAF 靶向药物失效;调控 RAC1 基因的上游蛋白 PREX2 突变频率也较高。抑癌基因 PTEN 可阻断 PREX2 介导的 RAC1 激活;PTEN 缺失,则会过度激活 PREX2/RAC1 信号通路,进而通过下游 PI3Kβ 介导肿瘤细胞增殖。

本文突破单独研究 PREX2 或 RAC1,而是验证阻断整条 PREX2/RAC1/PI3Kβ 信号通路,能否提升黑色素瘤对 BRAF/MEK 抑制剂的药物敏感性,为临床治疗提供新思路。

作者单位:英国癌症研究院贝特森研究所

期刊:Cancer Research IF: 22.6

发表年份:2024 年

样本:不同药物处理后,提取的细胞裂解液

芯片类型:RPPA 反向蛋白质微阵列

芯片扫描分析仪:法国 InnoScan 710 IR 微阵列生物芯片扫描分析仪

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研 究 方 法
将黑色素瘤细胞系设置单独组、联合给药组,并设置 DMSO 空白对照组,细胞孵育 24 h。随后,提取细胞裂解液,用生物芯片点样仪制备成 RPPA 硝酸纤维素覆膜抗体芯片;经封闭、一抗孵育、DyLight 800 近红外荧光标记二抗杂交,最后使用 InnoScan 710 IR 近红外微阵列生物芯片扫描分析仪完成荧光信号采集和数据分析。

结果显示:单独给药 MEK 抑制剂(AZD6244)仅能抑制 MAPK 通路, 而PI3Kβ/AKT 通路持续激活,从而驱动癌细胞增殖并产生耐药。联合使用 MEK 抑制剂和 PI3Kβ 抑制剂,可同时抑制 MAPK 与 PI3K/AKT 通路,大幅下调促增殖、抗凋亡相关蛋白的磷酸化水平。PTEN 缺失时,PREX2/RAC1 对 PI3Kβ 通路的激活效应更强,这类黑色素瘤细胞对 MEK 和 PI3Kβ 抑制剂联合方案更加敏感(如下图1)。

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图1:RPPA 反向蛋白芯片数据统计图,对比经药物处理 24 h的 PTEN 缺失型与 PTEN 正常型黑色素瘤细胞系。热图下方标注细胞系名称及给药方案;RPPA 硝酸纤维素覆膜抗体芯片检测的靶标蛋白(抗原)依据生物学过程/信号通路纵向排列。颜色标尺代表相对 DMSO 对照组的 RPPA 荧光强度 log₂ 倍数变化:红色代表高表达,蓝色代表低表达。

研 究 结 论

本研究阐明了 PREX2/RAC1/PI3Kβ 信号通路介导 BRAF V600E 突变的黑色素瘤对 BRAF/MEK 靶向药产生耐药的分子机制。证实了联合抑制 MEK 与 PI3Kβ可有效抑制 PTEN 缺失型黑色素瘤细胞的增殖并延长动物生存期。本文补充了黑色素瘤靶向耐药治疗的通路代偿机制,为晚期黑色素瘤联合治疗提供新思路。

原文链接:https://doi:10.1158/0008-5472.CAN-23-2814

法国 Innopsys 微阵列生物芯片扫描分析仪

InnoScan 710/710 IR;InnoScan 910;InnoScan 1100 AL

扫描高密度的微阵列生物芯片,用于小分子化合物/蛋白质/多肽/核酸/多糖超高通量筛选:

  • 高灵敏度:激光实时共聚焦光路,独立线性 PMT 检测器

  • 高分辨率:分辨率可达 0.5 μm/pixel

  • 高信噪比:线扫描方式,图片无拼痕无需阴影矫正,有效降低光漂白现象及信号损失

  • 快速扫描:多个激光光路同时扫描,多个 PMT 同步检测

应用方向:

  • 基因组学:寡核苷酸、核酸芯片对基因功能分析、基因表型分析、基因突变等

  • 蛋白质组学:蛋白、抗体芯片对蛋白表达水平检测、功能蛋白筛选、蛋白质互作研究等

  • 糖组学:糖芯片、糖蛋白芯片进行糖功能学、糖蛋白、植物凝集素等研究

  • 化合物:小分子化合物芯片进行配体筛选、药物研发、疾病靶点筛选

  • 细胞组织芯片:细胞代谢机制、 信号传导机制;组织间蛋白表达差异等

  • scWest 单细胞蛋白免疫印迹芯片

环亚生物科技(APG BIO)作为英国 ArrayJet 公司中国区独家代理,为客户提供芯片点样以及高通量筛选的整体解决方案和服务。

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