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Kasumi-1细胞AML1-ETO融合基因与20%血清培养

2026-10-27     来源:本站     点击次数:31

关键词:Kasumi-1,AML1-ETO,血清培养

做急性髓系白血病(AML)尤其是 t(8;21) 转位方向的同学,Kasumi-1 是绕不开的模型。它携带 AML1-ETO 融合基因,是研究这类白血病发病机制和靶向治疗的经典工具。

Kasumi-1 是人急性原粒细胞白血病细胞,从一名亚洲男性 AML 患者外周血分离的成髓细胞。它有 8:21 染色体转位,使 AML1-ETO 融合基因高表达;髓过氧化物酶阳性,显示髓性成熟形态。

细胞背景与来源

来源:人,急性髓系白血病外周血。悬浮生长,呈圆形或聚团;圆形透亮、膜完整的细胞是活细胞,拿不准可用台盼蓝染色计数确认活率。

应用场景与研究价值

  • 白血病研究:AML1-ETO 融合基因、t(8;21) 白血病发病机制研究。
  • 分化/因子应答:对 IL-3、IL-6、G-CSF、GM-CSF 响应,研究造血调控;PMA 可诱导巨噬细胞样分化。
  • 药物筛选:抗白血病药物活性评价。

培养特性与注意事项

  • 培养基:RPMI 1640 + 20% FBS + 1% 双抗——血清比例是 20%,不建议降低。环境 37℃、5% CO2、饱和湿度。生长较慢,需耐心。
  • 传代/换液:接种密度约 50 万细胞/mL,密度到 80 万/mL 时 1:2 传代。状态差时别离心,用半换液法;离心 900-1000 rpm、3 min。悬浮细胞偏脆弱,吹打轻、转速别太高。
  • 冻存:92% FBS + 8% DMSO(或 92% 完全培养基 + 8% DMSO),冻存难度较大,密度 200-300 万细胞/mL/管,程序降温盒 -80℃ 过夜转液氮。复苏:37℃ 水浴约 1 min,尽快离心去 DMSO。生物安全:BSL-1,人源细胞建议按 BSL-2 防护操作。
  • 注意:血清含量保持 20% 别降;碎片多时密度大时低速离心(900 rpm、3 min)去除,密度低时别离心;融化后尽快离心除 DMSO,避免损伤。

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