PROCLIN系列防腐剂 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
为解决生物样本处理过程中保存期短的问题,SUPELCO公司推出新一代高效生物防腐剂ProClin150,200,300,5000,可以有效地控制体外诊断试剂中微生物的生长。当浓度达到0.02%条件下,ProClinâ 系列防腐剂具有广谱抗菌活性,能在比较长的时间内抑制细菌、真菌和酵母菌等微生物的生长;同时,它又能保持体系中酶的活性,因此它是一种理想的可替代硫汞撒、叠氮化钠和庆大霉素等生物防腐剂。 ProClinâ 系列防腐剂的优点:
ProClin5000使用范围pH 2-12 ProClinâ 系列防腐剂作用原理: ProClinâ 系列防腐剂的活性成分主要是2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮(MCI)和5-氯-2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮(CMCI)。这两种成分抑制细胞的生长以及促使细胞凋亡的原理相同。活性成分在与细胞膜接触几分钟后,立即可以渗透到膜内并抑制细胞内酶的活性(见图1)。目标酶处于细胞代谢KREBS循环的中心位置,ProClinâ 系列防腐剂作用KREBS循环的四个不同位置(见图2):丙酮酸脱氢酶(pyruvate dehydrogenase),a -酮戊二酸脱氢酶(ketoglutarate dehydrogenase),琥珀酸脱氢酶(succinate dehydrogenase)和NADH脱氢酶(NADH dehydrogenase)。从而抑制细胞生长代谢,大分子的合成,引起细胞内能量水平迅速下降。由于能量体系的崩溃,细胞不能合成日常代谢所需要的化合物。 所有的细菌及真菌至少拥有部分KREBS循环,所以ProClinâ 系列防腐剂的适用的范围非常广泛。其次,ProClinâ 系列防腐剂具有多标靶作用位点,因此大大降低了因变异产生的微生物的耐药性。随着KREBS循环被阻断,细胞产生能量(以合成ATP为标志,见图3)和合成酶等生物活性物质的能力迅速下降,但其使用剂量却保持比较低的水平对人畜无害。
ProClin 系列防腐剂性能:
实 验数据表明,ProClin 系列防腐剂不会对诊断试剂中的关键酶与底物的结合速率产生影响,比如:辣根过氧化酶(HRP),碱性磷酸酶(AP)。图4. 250ppmProClin300对HRP(AP)与底物结合速率的影响 短期效应 即使ProClin300的使用浓度超过推荐浓度15倍时,其短期内对于HRP和AP的Km和Vmax 无影响(见表1)。
表1.ProClin300对HRP和AP的Vmax的影响
长期效应 长期使用ProClin 300同样不会对酶(例如:HRP和AP,见图5)的活性产生影响。 图5. 4度(37度)下ProClin对AP (HRP)活性的影响
在推荐使用浓度下,ProClin â 系列防腐剂不会对抗体的结合产生影响。通过研究ProClin 300对经纯化过小鼠IgM抗原与联结HRP的抗-小鼠IgM抗体之间结合的影响,表明浓度在300ppm以下,ProClin 300不会对其产生影响(见图6)。50ppm的ProClin 300保存上述抗体35天同样无影响。 图6. ProClin300对连接HRP的抗体影响 ProClin系列防腐剂的参数
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