脱落细胞粘取器应用范围及使用方法:
脱落细胞粘取器利用胶带直接黏取渗透性和非渗透性客体表面上的接触类脱落细胞,可广泛用于现场勘查和法庭科学DNA实验室中微量生物物证的提取、保存。胶带固定在座托上易于操作,使用前胶面上覆有一层保护膜,使用前后存放在有机玻璃密闭容器中,避免了污染。
1、打开取样盒盖,用干净的镊子揭去保护层
2、手持白色塑料底座,胶面对准检材提取部位,反复粘取10-15次
3、取样后,及时盖好盖子
4、在DNA提取区打开盖子,用干净镊子揭下胶膜,小心放入预先加好裂解液[1]的1.5ml Eppendorf 管中,56℃保温30min以上,然后按照试剂盒操作说明[2]进行提取。
[1]不同的实验室可按照各自作业指导书中的方法,进行DNA提取纯化。不同实验室、不同试剂盒所涉及的裂解液不尽相同,如0.01%SDS、TNE溶液、骨骼裂解液 中的lysis buffer、M48中的G2等,
[2]列出IFS提取微量DNA的常用方法-手动M48方法,供参考:
操作步骤脱落细胞粘取器
1、将适量实验检材放入1.5ml样品管中。
2、加入190μl缓冲液G2。
3、加入10μl蛋白酶K,旋涡振荡10秒钟。
精斑、软骨等需加DTT,可适当补加PK,2、3步骤总体积不要超过300μl。
4、56℃孵育1小时。精斑、软骨等孵育时间适当延长。(孵育过程中,取出振荡多次。)
5、13000rpm离心5分钟,转移200μl上清到1.5 ml样品管中。
6、在样品管中加入的MTL,MTL:样品溶液=3:1,摇匀磁珠然后加入30μl磁珠,充分混匀溶液,吸附15分钟(每2分钟摇匀一次)。
7、混匀后将样品管放在磁力架上,使磁力架和样品颠倒2、3次,吸出溶液,加入500μl 的MW1溶液,摇匀样品溶液,在磁力架上吸出溶液。
8、加入500μl的80%的乙醇溶液,摇匀样品溶液,放在磁力架上,使磁力架和样品颠倒2、3次,吸出溶液。
9、重复步骤8两次,使洗涤次数达到3次,最后一遍洗涤后应去除所有的洗涤液。
产品简介:
脱落细胞粘取器是利用特殊胶带直接或者间接粘取人体上皮脱落细胞,进行提取DNA的工具。由于脱落细胞粘取器可以快捷、简单、可靠提取DNA,因而广泛应用于刑事案件现场勘察和法医实验室提取生物物证以及亲子鉴定检材的提取等领域。
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应用范围及使用方法:
现场勘察和法医实验室物证提取使用方法:
带上一次性医用手套,取出脱落细胞粘取器,拧开盖子,用镊子撕去保护层,注意使用过程中不能用胶面台接触任何无关物体。
手持粘取器底座,用胶面台底面对粘取部位,反复粘取10次左右。
取样后,盖上盖子,做好记录标识。
在法医实验室用镊子揭下胶面台上的胶膜,放入离心管中进行纯化。
亲子鉴定脱落细胞提取方法:
带上一次性医用手套,取出脱落细胞粘取器,拧开盖子,用镊子撕去保护层,注意使用过程中不能用胶面台接触任何无关物体。
手持粘取器底座,用胶面台底面粘取手臂或者中指指肚细胞,反复粘取10次左右。
取样后,盖上盖子,做好记录标识。