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重组抗体的优势及应用

2021-03-10     来源:本站     点击次数:6591

重组抗体在实验中的优势可以说是十分突出,也成为了越来越多科研人员的选择。今天,就让我们来深入了解一下重组抗体及其优势。
 
01什么是重组抗体?它们是如何产生的?
 
重组抗体的生产是在体外完成的,具体来讲就是将免疫特异性重链和轻链抗体基因克隆到高效表达载体,再将这些载体引入表达宿主(例如细菌、酵母或哺乳动物)中,用于生产重组抗体。通常使用传统单克隆抗体的地方都可以使用重组抗体。
 
相比之下,单克隆抗体,通常是使用免疫动物的 B 细胞制备永生杂交瘤细胞,分泌所需的抗体。虽然这项技术可大量生产一致性高、特异性强、灵敏度高的单克隆抗体,但是,随着时间的推移,杂交瘤细胞系会出现遗传漂变,导致生产的抗体出现轻微变化。目前,高难度靶点,如毒素、核苷酸和膜结合蛋白的抗体很难用这种体外模型生产出来。
 
02重组抗体的优点
 
重组抗体克服了传统抗体生产的局限性,可实现最高水平的批间一致性、较高的可重复性,且特异性已经确认,且可保证长期供应。
 
  • 一致性高、可重复性高
 
由于重组抗体是从一组独特的基因表达形成的,所以重组抗体的生产是可控且可靠的。可以避免杂交瘤生产过程中的一些问题,如基因丢失、基因突变及细胞系漂移。因此,抗体的批间一致性非常高,可以为您提供研究或药物研发研究所需的高可重复性结果。
 
 
图 1.在 western blot 中利用多个样本类型对我们的抗 Bcl-XL 重组兔单克隆抗体 — ☞ab178844(左)和引用度较高的竞争产品 Bcl-XL 兔多克隆抗体进行了对比检测。看看我们的☞蛋白质印迹实验方案。
 
  • 灵敏度提高、确认过的特异性
 
采用重组技术,更容易通过抗体工程提高抗体灵敏度。所需克隆的选择过程发生在杂交瘤和重组克隆阶段,这样我们能够选择最优的抗体质量。
 
为了确保特异性,我们进行了基因敲除验证,提高您对结果的信任。以下案例证明,基因敲除样本没有出现预期的分子量条带,因此重组抗体与其他类型抗体之间的特异性存在差异:
 
图 2.我们利用基因敲除样本和野生型样本对我们的重组 TLE 1 抗体 [EPR9386(2)](左)和单克隆 TLE 1 [OTI1F5] 抗体进行了测试。
 
图 3.我们利用基因敲除样本和野生型样本对我们的重组 ☞GRIM19 [EPR4471(2)]抗体(左)和单克隆 GRIM19 [6E1BH7] 抗体进行了测试。
 
  • 量产容易、可持续供应
 
由于抗体基因是单独分离的且序列已知,所以可以进行任何规模的抗体表达,并且,可以保证抗体长期供应。对长期研究或者针对多个样本使用同一抗体的研究而言,重组抗体会很棒。
 
  • 无动物成分高通量生产
 
一旦分离出产生抗体的基因,就可以实现无动物成分体外生产。对于使用我们的噬菌体展示技术产生的抗体,其基因也可以用无动物成分的程序分离。
   
03客户为什么喜爱我们的重组抗体
 
50,000 多篇出版物刊载了我们的重组抗体。
 
  1. “在长期研究或像我们这样的服务实验室中,我们经常对许多样本使用同一抗体。这种情况下,批间一致性非常重要。每次收到新批次的抗体,我都会检测我的实验方案。我喜欢 Abcam RabMAb® 的一个原因是,它们总能得出相同的结果,因此,几乎不需要优化。”
  2. “相较多克隆抗体而言,所有的重组抗体都可以得出漂亮的特异性条带。它们的质量和得到的实验结果始终一致,而且用到的蛋白量很少。”
  3. “之前,我们尝试过多种 H3K27M 抗体,但有时很难区分表达 H3K27M 的阳性细胞和非特异性信号。这种抗体(H3K27M RabMAb®)检测 H3K27M 蛋白时的特异性更强、灵敏度更高,且背景非常低。”
 
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