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ACHROM进行层析柱柱效测定的方法

2022-03-28     来源:     点击次数:2164

柱效测定

样品和缓冲液

①1%的丙酮为样品,纯水或实验缓冲液为流动相,监测紫外吸收峰图;

 

②0.8M NaCl为样品,0.4M NaCl为流动相,监测电导峰图;

 

上样条件

①上样体积:为柱体积的1%;

 

②上样流速:30cm/h的线性流速;

 

积分

 

根据峰图积分,看积出的峰的理论塔板数(HETP)、对称性(AS)和柱效评价因子(塔板高度/填料粒径),每种填料都有其推荐的数值,需要查阅说明书。

 

具体积分流程如下

 

(以泰渡公司的ACHROM纯化仪过样品丙酮,通过对样品的紫外吸收峰图积分为例)

一、首先打开已保存的图,如果觉得线条太多,可以都取消只保留UV280

二、点击菜单栏峰积分

可看到如下界面

 

填写柱子高度以及填料粒径,并点击Peak window,可看到如下界面

 

选定要分析的峰,再点击Reject peaks,填写数字1,最后点击确定,出现下图;

 

三、右击选择性能

可看到如下界面:选择PeakTable,勾选理论塔板数和对称性

 

点击确定,就可以在图谱下查找柱效结果了

 

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