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组织学常规制片技术中石蜡切片的常见问题与补救方法介绍

2023-01-06     来源:本站     点击次数:6821

石蜡切片(paraffin section)是组织学常规制片技术中应用最为广泛的方法。石蜡切片不仅用于观察正常细胞组织的形态结构,也是病理学和法医学等学科用以研究、观察及判断细胞组织的形态变化的主要方法,所以广泛地适用于许多学科领域的研究中。

活的细胞或组织多为无色透明,各种组织间和细胞内各种结构之间均缺乏反差,在一般光镜下不易区分;组织离开机体后很快就会死亡和产生组织腐败,失去原有正常结构,因此,组织要经固定、石蜡包埋、切片及染色等步骤制成片子,才能在镜下清晰辨认其形态结构。

石蜡切片法包括取材、固定、洗涤和脱水、透明、浸蜡、包埋、切片与贴片、脱蜡、染色、脱水、透明、封片等繁多步骤;其中切片是决定片子质量好坏的最重要的环节之一。因而影响石蜡切片的因素比较多,本期文章我们归纳了常见切片问题有哪些,以及该如何进行补救。

  
蜡带侧弯
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1、刀口锋利不一,局部产生差异导致。
优化措施:可移动刀片,改用新刀口。


2、发现切片刀未覆盖到整个蜡块。
优化措施:调整刀口位置至刀片能切到整个蜡块。

3、如果蜡块左右硬度不一致。
优化措施:尽量使用锋利的新刀口,减轻干扰。

4、如果组织未居蜡块正中央。
优化措施:用刀片切去部分石蜡,使组织居中或重新包埋。

  
无法连片,切不出蜡带
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1、如果空气干燥。
优化措施:通过加湿器;哈气解决。


2、切片机回缩功能未开启?
优化措施:开启回缩功能。

3、材料边缘留蜡太少?
优化措施:重新包埋,注意组织尽量在正中央。

4、刀的角度不合适?
优化措施:调整余隙角/倾角。

  
切片卷起呈圆筒状
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1、蜡块冷冻过度?
优化措施:适度升温,用毛笔将蜡片摊开压住,切2至3片即成带。


2、石蜡过硬?
优化措施:加软蜡。

3、刀口太钝?
优化措施:换新刀口。

4、刀的倾角太大?
优化措施:减小倾角。

  
切片粘刀或皱褶
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1、蜡块温度偏高?
优化措施:适度降温。


2、石蜡过软?
优化措施:加强冷冻。

3、刀口上留有一层石蜡?
优化措施:清扫刀片,刀片刮蜡,二甲/苯擦拭刀口。

4、刀口钝?
优化措施:换新刀口。

5、含脂肪多?
优化措施:前期脱脂处理,包埋挤压脂肪。

 
 
切片纵裂
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1、刀有缺口?
优化措施:移动刀口。


2、石蜡中含有杂质?
优化措施:清除杂质,更换高质量石蜡。

3、刀口留有碎屑或细丝?
优化措施:清洁刀口。

4、组织太硬?
优化措施:蜡块入水浸泡软化。

5、组织内有止血钉?
优化措施:抠出止血钉。

  
切片有颤纹/梯田
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1、锁杆或零件松动?
优化措施:拧紧锁杆或零件。


2、刀口倾角偏大?
优化措施:适度减小倾角。

3、标本伸出太长?
优化措施:适度回缩,前移刀架。

4、蜡块没夹紧?
优化措施:清洁蜡块,夹头。

5、组织偏硬?
优化措施:表面脱钙,缓慢切片。

6、切片机内部磨损?
优化措施:维护更换新机。

  
切片厚薄不均
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1、切片机磨损?
优化措施:维护或更换切片机。


2、用力不当?
优化措施:调整用力。

3、锁杆或零件松动?
优化措施:拧紧锁杆或零件。

4、蜡块过硬?
优化措施:将石蜡块浸泡在水中。

5、温度变化?
优化措施:重新冷冻蜡块。

  
组织发生裂隙破碎或崩脱
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1、脱水处理不当?
优化措施:重新脱水。


2、有透明剂残留?
优化措施:增加浸蜡时间,重新包埋。

3、由于脱水机和透明剂的影响,使组织变硬发脆?
优化措施:调整脱水程序。

4、材料太硬或太大?
优化措施:脱钙,分开包埋。

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