胎牛血清培养效果的原因与注意事项
2023-09-19 来源:本站 点击次数:271
胎牛血清(fetal bovine serum，FBS)指通过对未出生的胎牛行穿刺采血，再经自然层析、离心、三级0.1µm微滤等处理而得到的上清液。
细胞培养中使用胎牛血清（Fetal Bovine Serum，FBS）相比新生牛血清（Newborn Calf Serum，NCS）可以获得更好的培养效果的原因，有以下几个可能原因参考：
1、营养成分的差异：FBS中含有更多的生长因子、激素、细胞黏附蛋白、维生素和矿物质等营养成分，这些成分可以提供细胞生长所需的必要营养物质，从而促进细胞的增殖和生存。相比之下，NCS中的营养成分可能较少，无法满足细胞的需求。
2、免疫反应的影响：FBS经过处理和筛选，可以去除或减少免疫反应相关的成分，如抗体和细胞因子。这有助于减少细胞培养过程中的免疫反应，避免细胞的损伤和死亡。相比之下，NCS中可能含有更多的免疫相关成分，可能导致细胞受到不必要的免疫反应而影响生长。
3、细胞亲和性的差异：FBS中含有较多的细胞黏附蛋白，可以促进细胞与培养基或培养器皿的附着和生长。这些蛋白质可以提供细胞所需的支持和信号，有利于细胞的生长和增殖。相比之下，NCS中的细胞黏附蛋白可能较少，不能提供足够的支持，导致细胞的附着和生长效果较差。
需要注意的是，细胞培养条件的选择往往是与具体的细胞类型和研究目的相关的。不同类型的细胞可能对不同的培养条件和血清类型有不同的要求。因此，在选择血清类型时，需要考虑细胞类型、生长要求和研究目的，并进行相应的优化和调整。此外，还可以使用无血清培养体系或其他替代品，以避免使用动物血清可能存在的问题。
注意事项：
1、 胎牛血清应在-20℃长期保存，如在4℃保存，不应超过1个月。
2、如果不能短期内使用完毕，解冻后请适当分装。血清结冰时体积会增加约10%，因此在分装血清时须使分装瓶预留一定体积空间，否则易导致分装瓶冻裂而发生污染。注意分装保存使用，避免反复冻融。
3、血清解冻：把在-20℃低温冰箱中保存的血清放入4℃冰箱中解冻约1天，待全部解冻后再分装。在解冻过程中每隔约2小时可轻轻摇晃均匀（尽量避免产生气泡），使温度与成分均一，减少沉淀的发生。切勿直接将血清从-20℃或更低温度进入37℃水浴解冻，这样因温度改变太大，容易造成蛋白质凝集而出现沉淀，从而使用血清的质量下降。
4、 请勿将血清在37℃放置过长时间，否则血清会逐渐变浑浊，同时血清中的有效成分也会逐渐失活而影响血清质量。
5、血清中的絮状沉淀物主要是解冻后血清中纤维蛋白及4℃长时间保存后血清中的脂蛋白变性造成的，这些絮状物不会影响血清本身的质量，可不用处理。如果必须要处理，可400g离心5分钟去除。
6、 正确地使用配制完全培养基：尽可能“现用现配”，并于一周内用完。
细胞培养中使用胎牛血清（Fetal Bovine Serum，FBS）相比新生牛血清（Newborn Calf Serum，NCS）可以获得更好的培养效果的原因，有以下几个可能原因参考：
1、营养成分的差异：FBS中含有更多的生长因子、激素、细胞黏附蛋白、维生素和矿物质等营养成分，这些成分可以提供细胞生长所需的必要营养物质，从而促进细胞的增殖和生存。相比之下，NCS中的营养成分可能较少，无法满足细胞的需求。
2、免疫反应的影响：FBS经过处理和筛选，可以去除或减少免疫反应相关的成分，如抗体和细胞因子。这有助于减少细胞培养过程中的免疫反应，避免细胞的损伤和死亡。相比之下，NCS中可能含有更多的免疫相关成分，可能导致细胞受到不必要的免疫反应而影响生长。
3、细胞亲和性的差异：FBS中含有较多的细胞黏附蛋白，可以促进细胞与培养基或培养器皿的附着和生长。这些蛋白质可以提供细胞所需的支持和信号，有利于细胞的生长和增殖。相比之下，NCS中的细胞黏附蛋白可能较少，不能提供足够的支持，导致细胞的附着和生长效果较差。
需要注意的是，细胞培养条件的选择往往是与具体的细胞类型和研究目的相关的。不同类型的细胞可能对不同的培养条件和血清类型有不同的要求。因此，在选择血清类型时，需要考虑细胞类型、生长要求和研究目的，并进行相应的优化和调整。此外，还可以使用无血清培养体系或其他替代品，以避免使用动物血清可能存在的问题。
注意事项：
1、 胎牛血清应在-20℃长期保存，如在4℃保存，不应超过1个月。
2、如果不能短期内使用完毕，解冻后请适当分装。血清结冰时体积会增加约10%，因此在分装血清时须使分装瓶预留一定体积空间，否则易导致分装瓶冻裂而发生污染。注意分装保存使用，避免反复冻融。
3、血清解冻：把在-20℃低温冰箱中保存的血清放入4℃冰箱中解冻约1天，待全部解冻后再分装。在解冻过程中每隔约2小时可轻轻摇晃均匀（尽量避免产生气泡），使温度与成分均一，减少沉淀的发生。切勿直接将血清从-20℃或更低温度进入37℃水浴解冻，这样因温度改变太大，容易造成蛋白质凝集而出现沉淀，从而使用血清的质量下降。
4、 请勿将血清在37℃放置过长时间，否则血清会逐渐变浑浊，同时血清中的有效成分也会逐渐失活而影响血清质量。
5、血清中的絮状沉淀物主要是解冻后血清中纤维蛋白及4℃长时间保存后血清中的脂蛋白变性造成的，这些絮状物不会影响血清本身的质量，可不用处理。如果必须要处理，可400g离心5分钟去除。
6、 正确地使用配制完全培养基：尽可能“现用现配”，并于一周内用完。
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