多肽是由氨基酸通过肽键连接而成的,肽序列检测指的是确定多肽或蛋白质中氨基酸的具体顺序。这种信息对于理解多肽的功能、结构、及与其它分子的相互作用至关重要。
一、主要技术:
1.Edman 降解法:
这是一个经典的序列测定方法,通过连续地从多肽的N端移除氨基酸残基来实现。该方法对于短肽特别有用,但长度受到限制,通常不超过50-60个氨基酸。
2.质谱分析:
质谱法已经成为现代肽序列检测的首选技术。通过将多肽切割成小片段,然后测定这些片段的质量和序列。高分辨率的质谱仪能够快速、准确地鉴定长链多肽和蛋白质的序列。
3.DNA测序:
考虑到蛋白质是由基因编码的,直接测定对应基因的DNA序列也是一种获取肽序列的方法。
图1
二、应用领域:
1.结构生物学:
确定肽的序列是预测其三维结构的首步。
2.功能生物学:
通过与已知功能的肽或蛋白质比对,可能推测未知肽的功能。
3.药物发现:
许多药物目标是蛋白质。确定它们的氨基酸序列有助于设计与之结合的小分子。
4.疾病诊断和研究:
某些疾病与蛋白质或肽的突变有关。确定这些突变有助于疾病的诊断和治疗。
5.进化生物学:
通过比较不同物种中相似肽的序列,可以推测它们的进化关系。
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