定义：趋化性（Chemotaxis，亦被称为化学趋向性）是趋向性的一种，指身体细胞、细菌及其他单细胞、多细胞生物依据环境中某些化学物质而趋向的运动。这对细菌寻找食物 (如葡萄糖) 十分重要，细菌以此趋进有较高食物分子浓度的地方，或远离有毒 (如苯酚) 的地方。在多细胞生物中，趋化性对其发展和其他正常功能一样不可或缺。正趋化性指趋向较高化学物质浓度的运动，而负趋化性则相反。

使用ibidiμ-Slide Chemotaxis细胞趋化载玻片的化学趋化实验，可以实时观察记录细胞的趋化行为。

ibidi细胞趋化板（80326）

实验流程：

在实验开始之前

必要设备

基本要求：

• 倒置相差显微镜（推荐 5 倍或 10 倍物镜）

• 用于延时图像采集的相机

• Stage Top 培养箱（大多数哺乳动物细胞类型需要）

推荐扩展：

• 用于并行图像采集的电动载物台

• 自动对焦

1.样品制备：

使用µ-Slide Chemotaxis，可以进行具有定义的趋化梯度的可重现的趋化性测定。

首先，细胞播种，这可以在 2D 或 3D 环境中完成。孵育和细胞附着后，根据确定的加载方案，每个腔室的两个储层都充满了趋化剂。

µ-Slide Chemotaxis包含 3 个独立的腔室，用于使用缓慢或快速迁移的细胞进行平行趋化性测定。

它允许在可重现的环境中创建精确定义的稳定趋化梯度。

2.活细胞成像

生理条件下的活细胞成像能够详细记录细胞随时间的迁移，这是正确分析趋化性测定所必需的过程。

成像周期的持续时间取决于细胞类型（例如，快速迁移的白细胞或缓慢迁移的肿瘤细胞或成纤维细胞）和环境条件（例如，趋化剂的类型和浓度）。用于缓慢迁移细胞的典型视频显微镜设置包括在 24 小时内每 2.5-10 分钟拍摄一张照片。

由于每个实验最佳地包含来自 20-40 个单细胞的跟踪数据，因此应使用低倍显微镜物镜，例如 4 倍或 10 倍。

ibidi Stage Top 培养箱提供显微镜下的生理环境，可在短期和长期趋化性测定期间实现活细胞成像。

MDA-MB-231 人乳腺癌细胞在胶原凝胶中迁移的延时显微成像。在 µ-Slide Chemotaxis 中以 EGF 作为趋化剂观察细胞 24 小时。生理条件由 ibidi 加热和气体培养系统维持。

3.细胞追踪

通常，趋化性测定的活细胞显微镜检查会创建时间图像堆栈，其中每个图像显示特定时间点的确切细胞位置。

为了量化它们的运动，通过确定它们在图像堆栈的每一帧上的位置来跟踪单个细胞。跟踪可以手动完成，也可以使用特殊软件自动完成。之后，每个跟踪单元格 (x, y) 的位置值可用于每个时间点 (t) 并可以进一步分析

自动跟踪和数据分析：

 MetaVi Labs的Chemotaxis FastTrack AI 图像分析是一种基于 AI 的自动图像分析解决方案，用于趋化性测定。基于网络的软件将快速而强大的细胞跟踪与人工智能 (AI) 相结合，无需标记即可进行客观且可重复的分析。只需将您的数据上传到您的 FastTrack AI 帐户并开始分析工作。在 1 到 2 小时内，您将收到一份详细的报告以供下载和进一步评估。

使用 ImageJ 手动跟踪插件跟踪后细胞痕迹的可视化。

ImageJ 手动跟踪插件跟踪后的输出；数据表，其中包含每个时间点 (t) 的每个跟踪单元格 (x, y) 的位置值。

4.数据分析:

广州科适特科学仪器有限公司是德国ibidi公司在中国区合作伙伴

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