当实验真正开始时，很多实验人员都会遇到一个几乎无法避免的问题—细胞污染。

轻则影响细胞状态和实验数据，重则导致整批细胞报废，实验周期被迫重新开始。

那么，细胞培养中的污染究竟从哪里来？又该如何识别和避免？

一、为什么细胞培养特别容易污染？

细胞培养（Cell Culture），是指在体外人工控制的条件下，为细胞提供适宜的生存环境，使其能够存活、增殖，并尽可能保持其原有的生物学特性。简单理解，就是：细胞培养体系本质上是一个非常适合微生物生长的环境。培养基中富含：葡萄糖、氨基酸、维生素、血清、蛋白；同时培养箱还提供:37°C恒温、稳定湿度、适直气体环境。这些条件不仅适合细胞生长，同样也非常适合细菌、真菌等微生物快速繁殖。一旦污染发生，污染微生物会：与细胞竞争营养、改变培养液 pH、释放代谢产物影响细胞状态最终导致细胞死亡或实验结果失真。因此，在细胞培养中，无菌操作始终是比较核心的基本原则。

二、细胞培养中常见的 4 种污染

1，细菌污染（常见类型）
细菌污染通常发展非常迅速，是实验室中常见的污染类型。
常见表现：
• 培养液快速变浑浊
• 培养基颜色变黄
• 显微镜下可见大量微小颗粒快速运动
常见来源:
• 操作过程中无菌控制不严格枪头、移液管或培养瓶口接触污染
• 培养基或血清污染
• 一旦发生细菌污染，通常不建议继续培养，应及时废弃污染细胞并彻底清洁培养设备。

2，真菌污染
真菌污染虽然发生频率低于细菌，但扩散速度同样很快。
常见表现：
• 培养液中出现絮状或棉絮状漂浮物
• 显微镜下可见丝状或分枝结构
• 细胞贴壁状态明显变差
真菌孢子广泛存在于空气中，因此在操作过程中暴露时间过长或操作环境不洁净，都可能增加污染风险。

3，支原体污染（比较隐蔽）
支原体污染是细胞培养中比较隐蔽、也比较容易被忽视的问题之一。与细菌或真菌不同，支原体污染通常不会导致培养液浑浊，因此肉眼很难发现。
可能出现的情况包括:
• 细胞生长速度明显变慢
• 细胞形态发生变化
• 实验数据重复性下降
因此，实验室通常需要定期进行支原体检测，确保细胞体系的可靠性。

4，细胞交叉污染
除了微生物污染外，细胞系之间的交叉污染也是实验室中需要警惕的问题。
例如：
• 不同细胞同时操作
• 标识管理不规范
• 移液器或枪头使用不当
都可能导致细胞系混杂，最终影响实验结果。

三、如何降低细胞培养污染风险？

在细胞培养中，与其事后补救，不如从源头控制风险。
常见的预防措施包括：
• 规范操作流程
• 在生物安全柜中完成操作
• 减少培养容器暴露时间
• 走期清洁培养箱和实验环境
• 建立良好的细胞管理习惯
• 定期进行支原体检测
• 合理进行细胞冻存与复苏
• 避免不同细胞系同时操作
• 选择稳定可靠的培养耗材

细胞培养过程中使用的培养瓶、培养板、移液管及离心管等耗材，本身也是细胞培养体系的重要组成部分。

四、思细胞培养类耗材

在细胞培养过程中，稳定的实验耗材可以有效降低人为操作带来的不确定性。细胞培养瓶/培养板高透明度，便于观察细胞形态与贴壁状态稳走的表面性能，支持贴壁细胞培养需求。针对贴壁细胞培养需求，耐思细胞培养类耗材提供 TC 处理与未 TC 处理 两种规格，可根据具体实验场景灵活选购。TC（Tissue Culture）表面处理通过对高品质PS基材表面进行受控改性，在不添加生物涂层的前提下提升表面亲水性并引入稳定极性官能团，从而增强细胞附着能力，促进贴壁细胞快速铺展与稳定生长。

离心管/冻存管
• 良好密封性，降低细胞转移与储存过程中的风险适用于细胞收集、冻存及复苏等基础操作血清移液管/吸头
• 内壁光滑，液体残留少
• 超强疏水性、超低吸附性
• 帮助降低人为操作带来的不确定因素

产品细胞培养类耗材均保证:
• 无菌
• 无热源/内毒素
• 无细胞毒性、
• 无 DNA、无 DNase/RNase

在细胞培养实验中，污染并不是偶然事件，而是常见的实验挑战。理解污染来源、建立规范操作习惯，并配合稳定可靠的实验耗材，是保持细胞培养体系长期稳定的关键。