- 肥胖与骨骼肌功能：肥胖导致骨骼肌纤维类型从慢肌（氧化型）向快肌（糖酵解型）转变，降低运动耐力和代谢功能。

- DHA的作用：DHA（二十二碳六烯酸）作为ω-3多不饱和脂肪酸，被报道可改善肌肉功能，但其分子机制尚不明确。

- m6A修饰的作用：N6-甲基腺苷（m6A）是mRNA的主要表观遗传修饰，参与调控基因表达，但其在DHA调节骨骼肌中的作用未知。

浙江大学动物科学学院在《BMC Biology》 发表文章“DHA alleviates diet-induced skeletal muscle fiber remodeling via FTO/m ⁶ A/DDIT4/PGC1α signaling “，研究发现DHA通过FTO/m ⁶A/DDIT4/PGC1α信号通路改善骨骼肌功能，为肥胖相关肌肉功能障碍的营养干预提供了新的思路和潜在靶点。

研究方法：

1. 动物模型

- 高脂饮食（HFD）诱导肥胖小鼠：分为正常饮食（NFD）、HFD、HFD+DHA三组，持续10周。

- 功能评估：体重、脂肪积累、葡萄糖耐量（GTT）、胰岛素敏感性（ITT）、运动耐力（倒置筛网和跑步机测试）。

2. 细胞模型

- C2C12肌母细胞分化：不同浓度DHA处理，检测肌管形成、线粒体含量及基因表达。

3. 分子机制

- m6A修饰分析：LC-MS/MS检测总m6A水平，MeRIP-qPCR验证特定基因（如Ddit4）的m6A修饰。

- 基因沉默与过表达：siRNA敲低FTO或Ddit4，质粒过表达FTO-WT/MUT，分析对PGC1α和线粒体的影响。

- 蛋白互作：RIP-qPCR验证YTHDF2与Ddit4的结合，mRNA稳定性实验分析Ddit4半衰期。

主要结果：

1. DHA改善肥胖相关代谢异常

- 体重与脂肪：HFD+DHA组体重、脂肪量显著低于HFD组，肝脂沉积减少。

- 代谢功能：GTT和ITT结果显示DHA改善葡萄糖耐量和胰岛素敏感性。

2. DHA促进慢肌纤维转换

- 肌肉结构：HFD+DHA组比目鱼肌（SOL）重量增加，腓肠肌（GAS）纤维直径增大。

- 纤维类型：慢肌基因（Myh7、Tnni1）上调，快肌基因（Myh4）下调，线粒体DNA含量增加。

- 运动耐力：倒置筛网和跑步机测试显示DHA组运动时间和距离显著延长。

3. 分子机制

- FTO/m ⁶A轴：DHA上调FTO（m6A去甲基化酶），降低Ddit4 mRNA的m ⁶A修饰。

- DDIT4稳定：低m ⁶A的Ddit4 mRNA避免被YTHDF2识别降解，促进其翻译。

- PGC1α激活：DDIT4蛋白积累激活PGC1α，促进线粒体生物合成和慢肌纤维形成。

机制示意图：

DHA → 上调FTO → 降低Ddit4 mRNA的m ⁶A修饰 → 抑制YTHDF2介导的降解 → DDIT4蛋白积累 → 激活PGC1α → 线粒体生成↑ + 慢肌纤维转换↑

实验中骨骼肌功能测试：

为了进行倒置网格测试，小鼠被直立放置在网格上，随后网格被旋转180°。记录小鼠掉下来的时间。对于跑步距离测试，小鼠被禁食2小时，并在跑步机上适应（南京卡尔文生物科技有限公司，KW-PT)1周，速度逐渐增加(5-10米/分钟)10分钟。跑步距离测试在10°坡度上进行，小鼠以10米/分钟的速度跑前10分钟，然后每10分钟增加2米/分钟，直到无法在跑步机上停留超过5秒(0.5mA)为止，小鼠在疲劳后立即被移除。

结论与意义：

1. 创新性发现

- 首次揭示DHA通过FTO/m ⁶A/DDIT4/PGC1α通路调控骨骼肌纤维类型转换，为肥胖相关肌肉功能障碍提供新机制。

2. 应用价值

- DHA可能作为潜在营养干预手段，通过调节RNA甲基化改善肌肉代谢，延缓肥胖相关肌肉退化。

3. 研究局限

- 需进一步验证DHA对FTO的直接调控机制及长期安全性。

- 探索其他m ⁶A修饰基因在肌肉功能中的作用。