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常用细胞培养包被试剂种类和使用方法及注意事项
2025-03-24 来源:本站 点击次数:327
什么是包被细胞培养瓶试剂?
包被试剂是一种用于处理培养瓶、培养板或培养皿表面的化学物质,能够模拟细胞在体内的生长环境,
促进细胞的附着、铺展和增殖
。通过包被处理,培养表面可以更好地支持细胞的生长和功能表达。
本文将为您详细介绍几种常用的包被试剂及其特点,并分享包被操作的注意事项,助您轻松提升细胞培养效果!
常见的包被试剂种类
和使用方法
01
明胶(Gelatin)
CSP132
常用于包被细胞培养板或培养皿,以促进细胞的贴壁和增殖,具有良好的生物相容性和细胞黏附性。
适用细胞
:胚胎干细胞、间充质干细胞、内皮细胞等。
特点
:价格低廉,易于使用,能够
提供良好的细胞附着支持。
使用范围:
常用于包被细胞
培养板或培养皿
,以促进细胞的贴壁和增殖,具有良好的生物相容性和细胞黏附性。
使用浓度:
1-20mg/ml 即1mg/ml-20mg/ml
包被体积:
通常以完全覆盖培养瓶底部为准,通常为 T-25瓶2.5ml, T-75瓶7.5ml
包被条件:
37°C 孵育≥2小时,或 4°C 过夜。
接种细胞:
使用前吸除多余明胶溶液,pbs洗1-2次后可以接种细胞。
0
2
多聚赖氨酸
(PLL)
CSP073
相对分子量为 70,000~300,000 的 PLL 可作为细胞培养的生长基质,能够
促进细胞粘附和贴壁,
是细胞培养中常用的细胞粘附剂。
适用细胞
:神经元细胞、原代细胞、悬浮细胞等。
特点
:通过静电作用增强细胞附着,
适合难以贴壁的细胞。
常用浓度:
0.01% 至 0.1% (w/v),即 0.1mg/ml 至 1mg/ml。
包被条件:
37°C 孵育
≥2小时
,或 4°C 过夜
。通常以完全覆盖培养瓶底部为准,使用前吸除多余溶液,用无菌 PBS 冲洗 1-2 次。
0
3
重组人纤连蛋白(FN)
CSP044
是一种重要的细胞外基质蛋白,具有多种生物学功能。它是一种高分子量的糖蛋白,能够
与细胞表面和细胞外基质中的多种组分结合,
如胶原蛋白、纤维蛋白、肝素、DNA和肌动蛋白等。
适用细胞
:
干细胞、间充质干细胞、内皮细胞、上皮细胞、肿瘤细胞、成纤维细胞。
特点:
作为细胞培养基质,提高细胞贴壁率,增强细胞代谢水平,缩短细胞生长时间
。
常用浓度:
1µg/cm² 至 10µg/cm²。
包被条件:
37°C 孵育≥2小时,或 4°C 过夜。
包被体积:
如下列表
04
鼠尾胶原蛋白Ⅰ型包被液(
1m
g/mL)
CSP145
鼠尾胶原蛋白是胶原蛋白的一种,主要为Ⅰ型胶原蛋白,广泛适用于内皮细胞、肝细胞、肌肉细胞和多种其他细胞类型的培养,
能够模拟细胞外基质的环境。
适用细胞:上皮细胞、肝细胞、肌细胞。
特点:
可以制备成一种清晰的凝胶,
提供 3D 基质或表面涂在组织培养板上,促进细胞贴壁和增殖。
常用浓度
:
1-5ug/cm²包被体积。
包被体积:
T-25瓶2.5ml去离子水+50ul ( 1MG/ML 鼠尾胶原蛋白Ⅰ ),随后将培养瓶放置4度过夜,吸出鼠尾胶原蛋白Ⅰ溶液,pbs洗2-3次后可加入细胞。
包被注意事项
1.
无菌操作:
所有操作应在无菌条件下进行,避免污染。
2.
均匀覆盖:
确保包被试剂均匀分布在培养瓶底部,避免局部过厚或过薄。
3.
浓度优化:
根据细胞类型和实验需求优化包被试剂的浓度。
4.
孵育时间:
根据试剂和实验要求调整孵育时间,确保充分包被。
5.
储存条件:
包被后的培养瓶可短期储存于 4°C,但建议尽快使用以保证最佳效果。
通过选择合适的包被试剂并遵循正确的包被步骤,可以有效提高细胞贴附和生长,为后续实验提供可靠的细胞模型。
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